目的:探究5-氮杂胞苷和地塞米松对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖能力和成骨分化能力的影响,为骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死提供新的思路和理论基础。方法:取体重100g左右SD大鼠股骨和胫骨骨髓经贴壁分离法分离骨髓间充质干细胞体外扩增和传代。倒置相差显微镜观察细胞生长形态,应用流式细胞术鉴定细胞表面标志CD90、CD34、CD45。以地塞米松和不同浓度5-氮杂胞苷干预细胞后用CCK8检测细胞增殖。取第三代细胞随机分为三组,分别为空白组、激素组、激素+5-氮杂胞苷组,各组应用相应药物干预3天后更换成骨诱导培养基诱导分化2周,进行碱性磷酸酶活性检测、茜素红染色,实时定量PCR和蛋白质免疫印迹检测细胞Runx2和PPARγ的表达情况。结果:所取得骨髓间充质干细胞呈梭形贴壁生长,旋涡状聚集,细胞纯度和均一性好,细胞表面标记CD90高表达,CD34、CD45低表达。10μM的5-氮杂胞苷干预干细胞增殖情况较好。第3代细胞经药物干预和成骨诱导后,与空白组相比,激素组Runx2基因表达降低,PPARγ基因表达升高,5-氮杂胞苷+激素组结果与激素组相反(P<0.05)。通过碱性磷酸酶活性检测、茜素红染色、RT-PCR和Western blot检测,发现5-氮杂胞苷+激素组成骨分化潜能高于激素组和空白组。结论:激素能抑制骨髓间充质干细胞成骨分化,降低骨髓间充质干细胞成骨分化潜能,5-氮杂胞苷能干预激素的相关作用,提高骨髓间充质干细胞分化潜能。