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为优选肉鸭消化道酵母益生菌并探究其抗逆性机理。本研究以本实验室自肉鸭肠道分离获得的7株酿酒酵母益生菌作为研究对象,筛选高耐热性、耐饥饿的菌株,并探究酵母菌细胞内热休克蛋白表达与环境温度的相关性和处于营养饥饿环境下酵母细胞壁葡聚糖和海藻糖含量与酵母细胞营养饥饿耐受性的关系。通过热应激处理比较不同菌株的热胁迫耐受性,然后对酵母细胞进行破壁,释放胞内蛋白,再依据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳)技术,分析不同菌株的热应激蛋白表达特性。通过对酵母细胞进行营养饥饿耐受性培养,然后对营养饥饿后的酵母细胞进行高效液相色谱进行细胞壁葡聚糖和海藻糖的检测。分析不同菌株营养饥饿耐受性与葡聚糖、海藻糖的关系。本试验的研究内容和结果如下:1、冻融、超声波、高压均质三种不同破壁方法相比较,高压均质法效果最好。最佳工艺条件为:均质压力140MPa,重复均质3次,原菌液稀释102倍,此时细胞壁破壁率可达94.54%。2、初步探讨酵母益生菌在不同温度胁迫环境下酵母的耐热机理,结果表明:(1)7个酿酒酵母菌株中有5株在常态时即存在热休克蛋白70家族和90家族热激蛋白的少量表达。(2)在30℃下热休克70家族与90家族蛋白条带不够清晰,37℃之后逐渐清晰,42℃后条带表达量对比值达到最大分泌到达最高值。之后虽然还存在热休克蛋白但其表达量不足且呈现逐渐减少趋势。(3)7号酵母菌株在45℃和48℃相对于其他菌株而言耐受性更佳,其热休克蛋白70家族和90家族表达水平均更高。3、初步探讨酵母益生菌在营养饥饿耐受性的机理,结果表明:(1)大多数的菌株在营养饥饿第6天时营养饥饿耐受性达到极限。第7株酵母的营养饥饿耐受性更好。进行营养饥饿第12天活菌落数依然高于其他菌株。(2)7株酿酒酵母在进行营养饥饿耐受性试验中都存在菌落数下降后再上升或经历缓慢下降的过程。根据现有文献进行推断,推测此现象可能是由于酵母细胞自身发生自噬现象。(3)进行酿酒酵母营养饥饿耐受性及其机理研究试验,得到7株酿酒酵母葡聚糖和海藻糖的含量。结果进行对照分析后发现:并初步得出结论4号菌株的营养饥饿耐受性较差,7号菌株营养饥饿耐受性更优于其它菌株。结论:肉鸭消化道酵母菌株的耐热性与营养饥饿耐受性存在差异,不同菌株的耐热性与热休克蛋白70家族和90家族的表达密切相关,试验菌株中7号菌株的热应激耐受性和营养饥饿耐受性最佳,可以作为后续肉鸭专用饲用酵母益生菌的备选菌株。本研究为开发高抗性、专一型的酵母益生菌制剂奠定基础。