【摘 要】
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目的研究lncRNA-AF113014对肝癌发生发展产生的作用及机制研究。方法1.通过qRT-PCR对从基因芯片技术筛选出的在正常肝细胞和肝癌细胞中具有差异表达的lncRNAs进行验证,从中选
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目的研究lncRNA-AF113014对肝癌发生发展产生的作用及机制研究。方法1.通过qRT-PCR对从基因芯片技术筛选出的在正常肝细胞和肝癌细胞中具有差异表达的lncRNAs进行验证,从中选取在肝癌细胞中低表达的lncRNA-AF113014作为研究对象。2.通过MTS和克隆形成实验检测了lncRNA-AF113014对SMMC-7721和SK-Hep1肝癌细胞增殖功能的影响。3.寻找lncRNA-AF113014的靶基因。在SMMC-7721细胞中用qRT-PCR和Western blot实验分别在mRNA和蛋白水平检测lncRNA-AF113014对靶基因表达的影响。4.MTS和克隆形成实验检测靶基因Egr2生物学功能。5.双虫荧光素酶实验对lncRNA-AF113014,miRNA-20a和Egr2三者间相互关系的研究。6.用裸鼠成瘤、免疫组化和Western blot实验在体内验证lncRNA-AF113014对肿瘤增殖和Egr2的影响。结果1.lncRNA-AF113014在肝癌细胞中呈低表达。2.lncRNA-AF113014抑制肝癌细胞增殖。3.lncRNA-AF113014促进靶基因Egr2的表达。4.Egr2能够抑制SMMC-7721细胞增殖。5.lncRNA-AF113014通过结合miRNA-20a从而上调Egr2的表达。6.lncRNA-AF113014在体内验证抑制肿瘤生长和促进Egr2表达。结论lncRNA-AF113014能竞争性的结合mi RNA-20a后上调Egr2的表达,从而抑制肝癌细胞增殖。
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