【摘 要】
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本文首先对多肽的一些内容进行了简单介绍,包括多肽的概念、多肽的合成发展史、多肽的各种制备方法、基本原理、国内外研究现状、及其分析纯化方法和研究意义。主要研究了睡
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本文首先对多肽的一些内容进行了简单介绍,包括多肽的概念、多肽的合成发展史、多肽的各种制备方法、基本原理、国内外研究现状、及其分析纯化方法和研究意义。主要研究了睡眠肽和成骨生长肽的Fmoc法固相合成及分离纯化,固相合成中系统地研究了树脂类型、保护基、缩合时间、反应溶剂、缩合剂、偶连率的测定方法和树脂切割条件对合成质量的影响,确立了最佳的工艺条件为:以DMF为反应溶剂,TBTU为缩合剂,TFA:对甲基苯酚:EDT:水为97:0.25:0.25:2.5(V/V)的切割液配制条件,3倍过量投料进行缩合反应,反应时间为3hr。此反应条件能够成功的合成睡眠肽和成骨生长肽。通过对睡眠肽和成骨生长肽的分离纯化研究,确立了纯化工艺为:先用凝胶色谱柱纯化,纯化后产品的纯度提高到60%,再以反相高效液相制备层析进行最终纯化,最终纯化结果纯度达到95%以上。此外,本文的其中一个目的是在原睡眠肽序列的基础上,引入了一段氨基酸序列,希望能够具有增强其穿透细胞膜作用,并进行了其生物活性测试。但是从测试结果看,没有明显的效果,成骨生长肽的穿膜活性实验因为时间有限,没有来得及做,下一步将继续测试其穿膜活性。论述了在合成这段序列过程中遇到的问题,并对其进行了分析,对后面的工作提出了一些建议。
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