小果型西瓜离体再生体系建立及多倍体诱导研究

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对小果型西瓜种子无菌萌发体系进行优化,并建立其离体再生体系,同时对小果型西瓜多倍体的诱导处理和倍性鉴定方法进行分析比较,为今后小果型西瓜的种质创制提供了依据和借鉴。主要研究结果如下:1、利用正交试验,优化小果型西瓜种子的无菌萌发体系,确定了最佳播种组合为:超声波处理时间15min、消毒时间8min、B5培养基。此时发芽率达到89.44%,污染率为13.33%2、对不定芽诱导设计正交试验,通过方差分析得出,对诱导率影响的主次顺序为外植体部位>接种方向>TDZ浓度>6-BA浓度。而最佳诱导组合为外植体部位为子叶近胚轴,接种方向为向下,6-BA浓度为0.5 mg/L,TDZ浓度为0.05mg/L。3、在不定芽增殖处理试验中,以MS为基本培养基,添加0.8mg/L 6-BA和0.08mg/L NAA的组合增殖系数最高,为4.88,且不定芽生长健壮。4、在西瓜再生苗生根的过程中,相同条件下的1/2MS培养基生根率比MS培养基高,且根系健壮。NAA浓度为0.8 mg/L时生根率最高,最高达到83.33%。5、西瓜再生苗炼苗移栽试验中,试验表明炼苗时间对成活率具有影响,西瓜再生植株炼苗天数在3d时,成活率最高,为75%。6、使用秋水仙素为诱导剂,对两个自交系西瓜品种进行多倍体诱导,试验结果表明小果型西瓜自交系W-19-30的诱变剂最佳处理浓度是0.08%,处理时间为3d,此时诱变率达到25.00%,小果型西瓜自交系W-19-6的诱变剂最佳处理浓度是0.06%,处理时间为3d,此时诱变率为25.00%7、运用形态学鉴定对多倍体植株进行初筛后,使用流式细胞仪对植株DNA含量进行测定,成功鉴定出诱导的四倍体植株,且两种方法的吻合率为85%。
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