辛伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小管间质CTGF、β-catenin表达的影响

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目的观察辛伐他汀对DN大鼠肾小管间质CTGF、β-catenin表达的影响。方法采用Wistar大鼠腹腔注射链脲菌素(STZ,60mg/kg)制备糖尿病模型,4周后大鼠24小时尿蛋白>30mg/d认为DN模型成功(n=20),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=10)和辛伐他汀治疗组(DS组,n=10),将正常大鼠10只作为对照组(N组)。DS组给予辛伐他汀灌胃20mg﹒kg-1﹒d-1;N组、DN组每日给予等量生理盐水灌胃。观察12周,依次记录大鼠体重、血糖、24h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(TC);取大鼠肾组织行HE染色,病理组织学观察;行免疫组化法检测肾小管间质中CTGF及β-catenin的表达;采用实时荧光定量PCR技术检测肾组织中CTGF及β-cateninmRNA的表达。结果(1)24h尿蛋白定量:12周末,DN组大鼠24h尿蛋白定量较N组明显增加[(131.99±11.60)mgvs.(10.05±0.85)mg,P<0.05],经辛伐他汀治疗后,DS组24h尿蛋白定量较DN组明显降低[(72.36±4.17)mgvs.(131.99±11.60)mg,P<0.05]。(2)肾功能、胆固醇:12周末,DN组大鼠Scr、BUN较N组增高[(80.25±4.99)μmol/Lvs.(36.92±1.60)μmol/L;(21.05±1.47)mmol/Lvs.(7.36±0.40)mmol/L,均为P<0.05];经辛伐他汀治疗后,DS组Scr、BUN较DN组降低[(64.65±4.52)μmol/Lvs.(80.25±4.99)μmol/L;(13.88±5.80)mmol/Lvs.(21.05±1.47)mmol/L,均为P<0.05]。各组TC相比差别无统计学意义(P>0.05)。(3)病理检查结果:12周末,与N组比较,DN组大鼠肾组织系膜区增宽,系膜细胞增生,肾小管扩张,上皮细胞水肿;经辛伐他汀治疗后大鼠肾组织系膜细胞和系膜基质增生减轻,少数肾小管扩张,上皮细胞水肿减轻。(4)免疫组化结果:N组大鼠肾小管间质几乎没有CTGF及β-catenin的表达;DN组大鼠CTGF、β-catenin的表达均高于N组(P<0.05);经辛伐他汀治疗后,DS组肾小管上皮细胞CTGF、β-catenin的表达均低于DN组(P<0.05),但高于N组(P<0.05)。(5)实时荧光定量PCR结果:12周末,与N组比较,DN组大鼠CTGF、β-catenin相对β-actin的mRNA表达水平均高于N组(P<0.05);经辛伐他汀治疗后,DS组CTGF相对β-actin的mRNA表达水平低于DN组(P<0.05);β-catenin相对β-actin的mRNA表达水平也较DN组降低(P<0.05);但均高于N组(P<0.05)。CTGF和β-cateninmRNA表达水平的变化趋势与免疫组化实验结果相符合。结论辛伐他汀可以降低24小时尿蛋白,保护肾脏功能,可以下调DN大鼠肾小管间质中CTGF及β-catenin的表达;提示辛伐他汀可能通过对CTGF和Wnt/β-catenin信号通路的调节,来发挥其延缓肾小管间质纤维化的作用。
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