研究背景恶性黑素瘤(malignant melanoma)是源自黑素细胞的恶性肿瘤,在皮肤肿瘤中恶性程度最高,转移性黑素瘤患者的五年生存率不足10%。近年来,黑素瘤的发病率逐渐增加,已成为危害人类健康的严重疾病之一。黑素瘤相关抗原家族A1(MAGEA1)是MAGE-A基因亚家族的成员,亦称为癌症-种系(CG)基因或肿瘤-睾丸抗原(CTA)基因。MAGEA1在多种肿瘤中均有表达,但其内在的生物学机制尚不清楚。课题组前期对MAGEA1在黑素瘤细胞和组织中的表达及其生物学功能进行了初步探讨,发现MAGEA1在黑素瘤中表达升高,并采用体外实验证明MAGEA1可以促进黑素瘤的增殖、侵袭和迁移,但其具体的分子机制尚不明确,因此我们进行了进一步的研究。研究目的通过探讨MAGEA1在黑素瘤转移中的作用及机制,深入认识黑素瘤的发生发展机制,为黑素瘤的靶向治疗提供新的思路和理论依据。研究方法1.免疫组化染色法检测黑素瘤和色素痣组织中MAGEA1的表达。2.利用TCGA公共数据和课题组转录组数据分析MAGEA1与黑素瘤转移的关系及其可能的信号通路。3.用western blot检测MAGEA1对黑素瘤上皮间充质转化的影响。4.用双荧光素酶报告系统检测稳定表达MAGEA1细胞株中的Wnt信号通路活性,并采用western blot和激光扫描共聚焦显微镜进行验证。5.用qRT-PCR和western blot检测Wnt信号通路中关键基因的表达情况。6.抑制Wnt信号通路后用western blot检测EMT标志物的表达,并用transwell实验检测肿瘤细胞的侵袭和迁移能力。研究结果1.黑素瘤和色素痣组织中MAGEA1表达呈差异性。2.MAGEA1可能促进黑素瘤患者发生转移。3.MAGEA1可以促进黑素瘤细胞的上皮间质转化并可能与激活Wnt/β-catenin信号通路相关。4.抑制Wnt/β-catenin信号通路后,肿瘤细胞的上皮间质转化被抑制,黑素瘤的迁移和侵袭能力下降。结论MAGEA1可以促进β-catenin进入细胞核,激活经典的Wnt信号通路,从而对上皮间质转化过程进行调控,影响黑素瘤细胞的侵袭和迁移能力。