壳聚糖/β-磷酸三钙/rhBMP-2可注射性复合体修复兔下颌骨缺损的实验研究

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目的:研究壳聚糖(chitosan,CS)/β-磷酸三钙(beta-Tricalcium phosphate,β-TCP)作为人重组骨诱导蛋白(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)注射性载体修复兔下颌骨缺损的效果及机制,探讨该复合体作为注射性骨替代物的可行性。为临床应用提供理论依据。方法:将24只新西兰大白兔共48处缺损完全随机分为4组:CS/β-TCP/rhBMP-2组、CS/β-TCP组、自体骨移植组、空白对照组。每组12侧骨缺损,分2、4、8周三个时间点,每个时间点4侧骨缺损,2、4、8周各取8只兔,进行大体观察、X线检查、苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,COLⅠ)免疫组织化学染色、骨密度测量、扫描电镜(scanning electronmicroscope,SEM)观察及图像统计学分析。结果:(1)大体观察显示,各实验组骨缺损区骨痂量和骨痂厚度随时间延长而逐渐增多增厚,且各时间点,CS/β-TCP/rhBMP-2组的骨痂量与自体骨组相当,而多于其它组。(2)X线显示,各组缺损区透光区面积随时间延长而逐渐减小,术后2周,CS/β-TCP/rhBMP-2组和自体骨组修复区边缘和中心有散在的小片状阻射影像,术后4周,空白对照组、CS/β-TCP组修复区中心才出现散在的小片状阻射影像,术后8周,CS/β-TCP/rhBMP-2组和自体骨组缺损区无透光区,其他组缺损区透光区也较4周有所减小。(3)组织学观察显示,各时间点CS/β-TCP/rhBMP-2组、自体骨组两组骨基质均分别较CS/β-TCP组和空白对照组多,且CS/β-TCP/rhBMP-2组和自体骨组骨基质无明显差别。空白对照组最差。(4)术后骨密度测量分析,各组材料骨修复区随时间的增长密度逐渐增大,8周时CS/β-TCP/rhBMP-2组与CS/β-TCP组以及BC组之间骨密度有显著性差异。(5)SEM结果显示,术后4周,材料与周围骨床呈纤维骨性结合,材料已开始降解;术后8周,CS/β-TCP/rhBMP-2组材料与周围骨床形成骨性结合,间隙基本消失:其他实验组间隙也有所减小,材料降解明显,界面处不能看到完整材料结构。(6)图像统计学分析显示,术后不同组间成骨面积比比较有显著差异(F=53.292,P=0.000),CS/β-TCP/rhBMP-2组(均数为22.96%)与自体骨组(均数为22.63%)之间无显著性差异,两组均优于空白对照组(均数为10.35)、CS/β-TCP(均数为10.73)组。不同观察时间之间有显著性差异(F=128.984,P=0.000),随着观察时间的延长,成骨面积比例升高。结论:CS/β-TCP/rhBMP-2可注射组织工程骨成骨效果与自体骨相当,明显优于CS/β-TCP组、空白对照组,可以加快骨缺损的修复过程,促进早期愈合,具有良好的临床应用前景。
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