目的:查阅参考獐牙菜苦苷与脑缺血再灌注损伤的相关文献,建立人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y缺氧缺糖/复氧(OGD/R)损伤模型,研究獐牙菜苦苷对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞的潜在神经保护作用及作用机制。另建立獐牙菜苦苷高效液相色谱分析方法并对其进行方法学考察,研究其溶解性和稳定性的影响因素,为深入开发利用獐牙菜苦苷提供实验基础和药理基础。方法:1.构建人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的OGD/R模型并随机分为:正常组(Control)、OGD/R损伤模型组(Vehicle)、OGD/R损伤+STM组(120、60、30μM)共计5组;2.用CCK-8法检测不同浓度(30μM,60μM和120μM)的STM作用于SH-SY5Y细胞24小时后的细胞毒性;利用CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞的细胞活力;3.用Annexin V/PI法测定各组凋亡细胞的比例;4.采用JC-1探针检测各组细胞线粒体膜电位(MMP)的变化;5.采用DCFH-DA染色法检测各组细胞内活性氧(ROS)生成水平;6.观察獐牙菜苦苷对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤的影响,采用Western blot方法对细胞内TLR4/PARP1/NF-κB通路相关蛋白的表达水平进行测定;7.采用高效液相测定STM在Hank’s平衡盐溶液中的溶解性与稳定性,为STM的体内吸收与代谢研究奠定基础。结果:1.结果显示,未经处理的对照组和的STM预处理组的细胞活力无统计学意义,表明本研究中选择的STM(30,60和120μM)浓度不具细胞毒性;2.CCK-8检测显示,OGD/R组细胞活力明显低于对照组(p<0.01),STM(30、60、120μM)预处理组细胞活力明显高于OGD/R组;3.细胞经OGD/R处理后存活率下降,STM(30、60、120μM)预处理可使缺氧缺糖4h、复氧24h的SH-SY5Y细胞活力增加(p<0.01);4.OGD/R降低了SH-SY5Y细胞的ΔΨm,STM(30、60、120μM)预处理使损伤细胞的ΔΨm明显升高;5.OGD/R显著提高了SH-SY5Y细胞内的ROS水平。STM(30、60和120μM)预处理抑制了OGD/R诱导的细胞内ROS的产生,减少了细胞凋亡;6.OGD/R主要诱导TLR4、MyD88、NF-κB p65和PARP1在细胞中的表达,STM预处理可降低TLR4、MyD88、NF-κB p65和PARP1的表达;7.STM在pH=3、pH=5和pH=7.4的HBSS溶液环境中稳定性良好,而在pH=9和pH=11的碱性环境中稳定性较差,光照和温度对STM稳定性无明显影响。结论:STM能够减轻OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,与减少细胞ROS水平和抑制细胞凋亡有关;STM在碱性HBSS溶液环境稳定性较差。