第一部分干扰素诱导蛋白p204对鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制的初步研究　　目的：研究干扰素诱导蛋白p204对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响并探讨其可能的机制。　　方法：用贴壁法离体培养SD大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMCs），通过细胞形态学观察及细胞免疫组化方法鉴定细胞，原代培养经传代后的第3-4代生长状态良好的细胞用于下游实验。实验分为5组，即阴性对照组（N组）、干扰素α（IFN-α）诱导组（IFN组）、20％胎牛血清+IFN-α诱导组（F+I组）、Ifi204小干扰RNA（siRNA）组（siRNA组）及非特异性siRNA组（C组）。IFN组加终浓度为2000u/ml IFN-α，siRNA组转染Ifi204基因的小干扰RNA，F+I组用20%胎牛血清刺激12h后与IFN组同步加IFN-α，分别干预6h，细胞去除干预因素后继续培养48h后观察mRNA、蛋白及细胞增殖的变化。用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖，流式细胞仪分析细胞周期，用RT-PCR、Real Time qRT-PCR法和Western blotting分别检测mRNA和蛋白表达。　　结果：VSMCs呈梭形或长梭形贴壁生长，倒置相差显微镜下细胞立体感明显，传代后5-7天细胞呈“铺路石”样，经α肌动蛋白抗体（αSMA）免疫组化染色，＞95%的细胞染色阳性。IFN-α可诱导鼠VSMCs p204 mRNA和蛋白表达上调，降低VSMCs细胞活力和细胞周期G1/S转换，伴p21 mRNA和蛋白表达上调，Ras蛋白表达减少，Raf、Erk磷酸化水平下降。转染Ifi204 siRNA可抑制p204和p21表达，伴Ras蛋白表达增多，提高VSMCs细胞活力和促进细胞周期G1/S转换。　　结论：p204表达可抑制鼠 VSMCs的增殖，该效应可能与激活 p21表达及抑制Ras/Raf/Mek/Erk信号通路的激活有关。　　第二部分干扰素诱导蛋白IFI16对人血管内皮细胞增殖的影响及其机制的初步研究　　目的：观察干扰素诱导蛋白IFI16对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的血管内皮细胞(VECs)增殖的影响，探讨IFI16在VECs增殖调控中的作用及可能机制。　　方法：实验分为阴性对照组（Control组）、IFN-α诱导组（IFN组）和siRNA组（siRNA组），各组均用bFGF（终浓度为100ug/L）刺激24h后IFN组加干扰素-α（IFN-α）、siRNA组转染IFI16基因（Ifi16）的小干扰RNA（siRNA），分别干预6h，然后观察24h、48h、72h三个不同时间段的mRNA、蛋白及细胞增殖的变化。用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖，流式细胞仪分析细胞周期，用半定量RT-PCR法和Western blotting分别检测IFI16和p21的mRNA和蛋白表达，同时观察Ras蛋白的表达。　　结果：IFN-α可诱导VECs IFI16 mRNA和蛋白表达上调，降低VECs细胞活力和细胞周期 G1/S转换，伴 p21 mRNA和蛋白表达上调及 Ras蛋白表达下调。转染Ifi16 siRNA可抑制IFI16和p21表达，促进Ras蛋白表达，提高VECs细胞活力和促进细胞周期G1/S转换。　　结论：IFI16表达可抑制bFGF诱导的VECs的增殖，该效应可能与激活p21及抑制Ras的表达有关。