ZIC1基因在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

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目的:  探讨小脑锌指结构1(Zinc finger of the cerebellum1,ZIC1)基因在人乳腺癌组织中的表达并分析其意义;构建pcDNA3.1-ZIC1质粒,通过转染改变乳腺癌细胞中ZIC1基因的表达水平,进而研究该基因对细胞增殖能力的影响,以期为乳腺癌的分子诊断、预后评估及基因治疗提供新的理论依据。  方法:  (1)采用免疫组织化学(IHC)法检测238例乳腺癌组织和40例癌旁组织中ZIC1蛋白的表达情况。  (2)采用统计学方法分析ZIC1蛋白的表达与乳腺癌临床病理参数之间的关系及意义。  (3)采用脂质体转染法将pcDNA3.1-ZIC1质粒瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞(实验组),以未转染细胞和转染pcDNA3.1空载体细胞作为对照。  (4)采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白质印迹(Western Blot)法检测各组细胞中ZIC1 mRNA和蛋白的表达情况。  (5)采用噻唑兰(MTT)法检测各组细胞增殖能力的变化,并绘制细胞生长曲线。  结果:  (1)ZIC1蛋白阳性表达率在癌旁组织中为77.5%(31/40),而在乳腺癌组织中仅为39.1%(93/238),两者差异有统计学意义(P<0.05)。  (2)ZIC1蛋白的表达与乳腺癌患者的病理分型、组织学分级和淋巴结转移有相关性(P<0.05);而与患者的年龄、肿瘤大小、雌激素受体、孕激素受体无相关性(P>0.05)。  (3)RT-PCR及Western Blot法检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比较,实验组中ZIC1 mRNA和蛋白的表达增强。  (4)MTT法检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比较,实验组细胞的增殖能力显著减弱。  结论:  (1)与癌旁组织相比,乳腺癌组织中ZIC1蛋白的阳性表达率明显下降。  (2)ZIC1蛋白的表达与乳腺癌患者的病理分型、组织学分级和淋巴结转移有相关性。  (3)转染pcDNA3.1-ZIC1质粒后,乳腺癌MDA-MB-231细胞中ZIC1基因的表达明显增强。  (4)上调ZIC1基因的表达,可显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖能力。  综上所述,我们认为ZIC1基因可能在乳腺癌的发生、发展中发挥着重要作用,有望成为乳腺癌分子诊断、预后判断及基因治疗的有效靶点。
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