哮喘KL-6表达的实验研究

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目的通过观察哮喘小鼠血清、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid ,BALF)中KL-6(krebs. von den lungen-6)的表达,卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)干预对哮喘小鼠BALF中KL-6、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)表达的影响,了解KL-6是否反映哮喘气道炎症程度,并探讨其可能作用机制。方法健康雄性昆明小鼠50只,随机分成五组,每组10只。①哮喘Ⅰ组:每只小鼠用10ug卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和1mg氢氧化铝(Al(OH)3)腹腔注射进行致敏,1%OVA雾化吸入进行激发3天。②哮喘Ⅱ组:OVA致敏、激发方法同哮喘Ⅰ组,但激发次数为7天。③哮喘Ⅲ组:OVA致敏、激发方法同哮喘Ⅰ组,但激发次数为11天。④BCG干预组:OVA致敏、激发方法同哮喘Ⅱ组,但在OVA致敏前7、3、1天每只小鼠皮内注射BCG0.025mg。⑤正常对照组:用同等剂量的生理盐水代替OVA进行腹腔注射和雾化吸入。所有小鼠于末次雾化吸入24小时后取材,收集BALF进行细胞总数、嗜酸粒细胞计数;采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测血清及BALF中KL-6水平、BALF中IL-4和IFN-γ水平;肺组织切片行苏木素-伊红(HE)染色,观察病理学改变。结果1.肺组织病理学分析:各哮喘组肺组织中均见大量炎细胞浸润,随激发次数增加炎细胞浸润渐次明显。2. BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞计数:各哮喘组小鼠较正常对照组BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞计数均明显增高,并随激发次数的增加依次升高。3.各哮喘组血清和BALF中KL-6水平:各哮喘组小鼠较正常对照组血清和BALF中KL-6水平均明显增高,并随激发次数的增加依次升高。4.与对照组比较,哮喘组、BCG干预组小鼠BALF中KL-6、IL-4均升高,BCG干预组又较哮喘组下降;哮喘组、BCG干预组小鼠BALF中IFN-γ水平较对照组均下降,BCG干预组又较哮喘组升高。5.哮喘组、BCG干预组小鼠BALF中KL-6水平与IL-4/IFN-γ均呈正相关。结论1. KL-6在哮喘小鼠血清和BALF中有表达,并与激发次数增加导致气道炎症加重呈正相关,可以反映哮喘病情严重程度。2. BCG干预可以影响哮喘小鼠BALF中KL-6的表达,KL-6水平与IL-4/IFN-γ呈正相关,KL-6表达与Th1/Th2平衡中Th2优势有关。3. KL-6可能类似细胞黏附分子,在哮喘发生发展中发挥重要作用。
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