miR-711对胃癌SGC-7901细胞侵袭迁移及增殖的影响

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目的:利用Transwell侵袭实验、细胞划痕实验、MTT实验分别探讨miR-711在人胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移及增殖中的作用,为miR-711在胃癌中防治作用提供理论依据。方法:通过脂质体瞬时转染法将miR-711过表达(miR-711mimics)、miR-711抑制表达(miR-711inhibitors)、miRNA空质粒转染人胃癌细胞株SGC-7901,以miRNA空质粒转染组作为阴性对照组(NC组),以空白转染组作为空白对照组(control组)。转染48小时后在荧光显微镜下观察转染效率,Real-time PCR验证转染后各组中miR-711的表达,Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,MTT实验检测细胞的增殖能力。结果:(1)转染48小时后,在荧光显微镜下观察计数,miR-711过表达及miR-711抑制表达、miRNA空质粒转染人胃癌细胞SGC-7901,转染效率达75%以上;Real-time PCR检测不同转染组中miR-711的相对表达量,miR-711过表达转染组、miR-711抑制表达转染组及阴性对照组中的miR-711表达量分别是空白对照组的7658.6倍、0.35倍、1.2倍。(2)Transwell侵袭实验结果显示(转染48小时后即细胞接种24h后,平均每低倍镜*100倍下观察):1)与空白对照组穿膜细胞数39.5±1.9比较,miR-711过表达转染组穿膜细胞数12.1±1.4,明显下降,两者比较P<0.05;2)miR-711抑制表达转染组穿膜细胞数为53.5±2.5,与空白对照组39.5±1.9比较有显著性差异P<0.05;3)空质粒转染组穿膜细胞数33.5±2.1,与空白对照组39.5±1.9比较,差异无统计学意义P>0.05。(3)划痕实验显示:划痕后24小时miR-711过表达转染组SGC-7901细胞愈合率为23.8%±3.2%,与空白对照组36.5%±2.6%比较P<0.05;miR-711抑制表达组SGC-7901细胞愈合率为48.7%±4.5%,与空白对照组36.5%±2.6%比较P<0.05;48小时miR-711过表达转染组SGC-7901细胞愈合率为56.2%±3.5%,与空白组76.3%±2.5%比较P<0.05; miR-711抑制表达转染组SGC-7901细胞愈合率为88.7%±4.3%,与空白组76.3%±2.5%比较P<0.05。(4)MTT实验结果显示SGC-7901细胞转染miR-711过表达后48h、72h、96h(即接种后24h、48h、72h),其增殖抑制率呈时间依赖性增加,依次为7.2%、8.3%、10.7%,与空白转染组比较,均P<0.05;SGC-7901细胞转染miR-711抑制表达后48h、72h、96h,其增殖率呈时间依赖性增加,依次为6.5%、8.6%、9.3%,与空白转染组比较,均P<0.05;阴性对照组与空白转染组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:过表达miR-711能抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭迁移及增殖,提示miR-711与胃癌的发生发展有关。
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