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三叶青(TetrastLgma hemLeyanum Diels et Gilg)是葡萄科崖爬藤属多年生蔓生藤本植物,民间用来治疗小儿高热、慢性咽喉炎、抗肿瘤等,特别是在抗肿瘤方面为癌症患者带来了福音。三叶青野生资源因过度采挖已濒危,被列入了浙江省首批农作物种质资源保护名录品种,且三叶青人工栽培技术受制,因此探索将不定根培养技术来生产其次生代谢物抗癌黄酮,不仅填补此方面研究的空白,而且是保护其野生资源和解决市场供需矛盾的有效途径。本试验以三叶青叶片为外植体,设计了愈伤诱导、继代增殖和不定根分化以及扩繁试验,分析了三叶青愈伤诱导、增殖、不定根诱导的主要影响因子,初步摸索了不定根扩繁的激素条件,旨在为今后利用三叶青不定根工业化生产抗癌黄酮提供技术支撑。本试验主要结论如下：(1)确定了三叶青愈伤组织的诱导培养基配方为MS+30g·L-1蔗糖+2.0mg·L-6-BA+0.2mg·L-1NAA,愈伤诱导率100%,愈伤组织大,绿而致密。(2)确定了三叶青愈伤组织继代增殖的培养基配方为MS+30g·L-1蔗糖+2.0mg·L-6-BA+0.2mg·L-1NAA,培养温度为28℃,从节约成本出发,光照光源宜采用日光灯；如需提高三叶青愈伤干物质含量,可采用红蓝混合光源,比例为9：1或7：3。(3)确定了三叶青愈伤不定根的诱导培养基配方为3/4MS/MS+1.0mg·L-1NAA,蔗糖添加浓度为20-40g·L-1。(4)初步确定了三叶青不定根扩繁培养基为MS+30g·L-1蔗糖+1.0mg·L-1NAA+1.0mg·L-6-BA,不定根鲜重增长率达到145.56%；用紫外分光光度仪测定各处理下培养的不定根,检测到含有黄酮类化合物,总黄酮含量最高达到24.4mg·g-1·DW-1,高于愈伤组织中总黄酮含量。