大肠埃希氏菌（Escherichia coli,E.coli）给狐狸养殖业带来严重损失,临床上除了使用抗生素治疗E.coli病之外,疫苗也是防控E.coli病的有效途径。本研究分离鉴定出狐源致病性E.coli,以CHL-147菌株为试验菌株,对其胞外产物（Extracellular products,ECP）提取纯化。对ECP的酶活性、致病性、免疫原性检测并分析、鉴定其蛋白成分。为发掘新的E.coli潜在亚单位疫苗提供参考数据。本试验在毛皮动物养殖场采集的165份样本中,通过实验室常规方法,分离鉴定出47株狐源大肠杆菌,检出率为28.5%,其中36株菌具有致病性。通过玻板凝集试验,36株致病性E.coli检测出7种不同的血清型。O₁和O₇₈型为本地区的优势血清型。采用饱和硫酸铵沉淀法对E.coli CHL-147株的ECP进行提取并纯化,使用平板扩散法对ECP的酶活性进行初步见检测,结果表明E.coli CHL-147株ECP具有蛋白酶活性和溶血素活性;使用SDS-PAGE凝胶电泳对ECP的蛋白成分进行初步鉴定,SDS-PAGE图谱显示ECP的蛋白主要分布在180 k Da和110 k Da处;使用小鼠对其腹腔注射ECP检测ECP的致病性,结果显示E.coli CHL-147株ECP具有很弱的致病性,但ECP与CHL-147株共同感染小鼠时可使CHL-147株的半数致死量从1.01×10⁷ CFU下降到7.08×10⁵ CFU。将E.coli CHL-147株ECP对小鼠进行免疫,结果发现免疫ECP能够激发小鼠的体液免疫系统,使小鼠抗体水平升高;但不能激发细胞免疫系统。免疫后对小鼠进行CHL-147株攻菌,结果显示免疫过的小鼠对该菌株具有较好的抵抗力,保护率为60%。利用LC-MSMS方法对ECP中的蛋白进行分析,共检出852种蛋白,具有广泛的生物学功能。参与抗生素的合成、氨基酸的合成以及碳代谢等多种信号通路。结论:36株致病性狐源E.coli中以O₁和O₇₈血清型为主。CHL-147菌株ECP具有溶血素和蛋白酶活性,可降低CHL-147菌株的半数致死量;ECP含有852种蛋白成分,免疫小鼠可激发小鼠体液免疫系统,具有良好免疫保护效果。