【摘 要】
：
根结线虫(Root knot nematode,RKN)是为害经济作物的重要病原物之一,适宜寄主多,分布范围广。利用生防菌可有效的控制根结线虫种群数量并降低危害。委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)Snea253是本试验室前期获得的具有杀线虫活性的生防放线菌,通过生物信息学分析已知,γ-氨基丁酸转氨酶基因(gabT)是参与Snea253碳代谢的重要基因之一。为明确gab
论文部分内容阅读
根结线虫(Root knot nematode,RKN)是为害经济作物的重要病原物之一,适宜寄主多,分布范围广。利用生防菌可有效的控制根结线虫种群数量并降低危害。委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuelae)Snea253是本试验室前期获得的具有杀线虫活性的生防放线菌,通过生物信息学分析已知,γ-氨基丁酸转氨酶基因(gabT)是参与Snea253碳代谢的重要基因之一。为明确gabT基因通过调控Snea253的γ-氨基丁酸(GABA)代谢通路而影响菌株的活性,本试验以紫外诱变所得Snea253弱毒株(Snea253-R)为材料,以南方根结线虫二龄幼虫(J2)为靶标,过表达gabT基因,通过酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱法分别检测菌株中GABA和下游代谢产物琥珀酸的含量及杀线虫活性,同时检测在不同碳源培养条件下野生型菌株gabT基因表达水平、产物含量和杀线虫活性。研究结果如下:1.过表达载体pIB139-gabT的构建:以野生型菌株DNA为模板,以pIB139为载体,进行过表达载体的构建。通过目的基因gabT与T载体pGEM-T easy的连接后转化,提取重组质粒pGEM-gabT。对质粒pGEM-gabT和pIB139载体用XbaⅠ和NdeⅠ内切酶双酶切后进行连接转化,提取质粒pIB139-gabT。通过酶切鉴定,获得构建成功的过表达载体pIB139-gabT。2.gabT基因调控Snea253的GABA代谢途径分析:通过PEG介导的方法将过表达载体pIB139-gabT与委内瑞拉链霉菌弱毒株(Snea253-R)的原生质体融合,然后利用R2YE再生培养基和高氏一号培养基获得委内瑞拉链霉菌Snea253的过表达菌株R-pIB139。通过实时荧光定量PCR检测,菌株R-pIB139中gabT基因相对表达量是弱毒株Snea253-R的3.69倍。GABA和琥珀酸含量检测:通过酶联免疫法(ELISA)对菌株发酵液中GABA含量进行检测,发现过表达菌株R-pIB139中GABA含量显著低于弱毒株Snea253-R,而琥珀酸含量显著高于弱毒株Snea253-R,接种24 h后,过表达菌株R-pIB139比弱毒株Snea253-R杀线虫活性提高了39%。琥珀酸活性检测发现浓度越高,琥珀酸对南方根结线虫J2的校正死亡率越高,2000μg/m L时48 h线虫校正死亡率为98.75%。3.碳源调控对Snea253的GABA代谢影响:供试八种碳源对Snea253的GABA代谢均有不同程度影响。实时荧光定量q PCR检测gabT基因在野生型菌株中相对表达量,以玉米淀粉和可溶性淀粉为碳源的培养液中,gabT基因相对表达量很高,而以马铃薯淀粉和葡萄糖为碳源的培养液中相对表达量最低;以马铃薯淀粉和葡萄糖为碳源的发酵液中GABA含量较高,以玉米淀粉和可溶性淀粉为碳源时GABA含量较低;而以玉米淀粉和可溶性淀粉为碳源的培养液杀线虫活性最高。本研究结果表明gabT基因通过调控GABA支路产生更多的下游产物,杀线虫活性增强,而且其表达受培养基中碳源的影响。研究结果为碳代谢相关基因调控生防菌的活性及其生防效果提供了新的理论依据,同时为防控植物线虫的生防菌产业化生产奠定了相应的理论基础。
其他文献
公司高管如何管理公司信息披露,一直是财务学研究的一个热点问题。研究发现,为了获取职业晋升或私有收益,CEO有动机管理公司信息流以影响市场对公司前景和其个人能力的判断。高层梯队理论指出,公司的管理层,尤其是CEO,其年龄、性别、任期、教育背景、种族、社会经济基础等等,会对其决策行为产生影响。其中,任期作为最高管理者的特征之一是影响企业财务行为的关键因素。在高管的诸多背景特征中,有关CEO任期的研究较
国家监察改革是建立具有中国特色反腐败制度的创新之举,也是健全国家监督体系的创新之举。国家监察体制改革经历了试点和总结后,《中华人民共和国监察法》(以下简称《监察法》)应运而生,并于2018年3月20日开始实施。《监察法》将以往分散的预防腐败机构进行整合,成立监察委员会并将其作为行使国家监察职能的专门机构,主要目的是为了预防腐败和加强对公权力的监督。2018年3月11日通过的《宪法修正案》赋予监察机
油画人物在美术史上的地位占据了很大的比重。本次创作,笔者以彝族舞者作为创作主体进行艺术绘画表达,在人物表现上运用的现实主义写实手法与笔者对光的认知作结合产生的创作灵感。本文以创作背景介绍、具体创作方法、现实主义绘画引发的思考并结合笔者自己的感悟来阐述自己的创作过程。这一系列创有两个主题《心灵之光》、《人间百态》。分别是对于现实思考和对于人物戏剧用光的创作。《心灵之光》是放大个人情绪的作品,通过一系
最近,因为视频技术的持续发展,数字媒体中的流媒体业务不断增长,视频流成为了网络流媒体的主要内容。不同用户的差别较大,例如用户所使用的设备不一样、用户对不同视频的喜爱不同,这些差异性都给视频数据的传输业务造成很大的挑战。因此为了提高用户的视频体验质量(Quality of Experience,Qo E),本文研究了车载视频的传输优化问题。本文提出两种基于集群的SVC车载视频传输优化方法。首先,本文
随着人工智能被应用到各个行业领域,产生的问题也着实不少,具体到文化创作领域,引起热议的就是人工智能生成内容的著作权问题。目前而言,其生成物已经不仅是简单的对数据进行
水体消毒过程中,消毒剂会与水中有机物反应生成有毒有害的消毒副产物(DBPs),引起了人们的广泛关注。水环境中残留的氟喹诺酮类药物(FQs)亦可作为有机前体物在氯化消毒过程中形成特殊的卤代DBPs。而当水中含有卤素离子(Clˉ、Brˉ、Iˉ)时,可能产生毒性更强的溴代/碘代消毒副产物(Br/I-DBPs)。本文在大量文献查阅基础上,针对海水养殖中报道使用过的7种氟喹诺酮类药物(FQs),分别对Brˉ
高强圆钢管已经成为大跨空间钢结构关键部位主选型材,其成品材料性能必须得以保证。而钢管成品的材料性能受轧制工艺影响,离散性大,焊后接头断裂性能亦复杂。因此,本文基于微观损伤断裂机理,以Q460国产高强热轧圆钢管材及相应焊缝熔敷金属材料为研究对象,结合试验和有限元模拟研究手段,区分母材、热影响区和焊缝三个区域,由材料至构件两个层次,对高强钢管成品材料性能及其焊后接头处断裂性能进行了系统研究。本文主要工
子空间聚类中是一种在假设处于同一子空间中的数据可以通过属于同一子空间中的其他数据线性表示的条件下,将高维空间化作低维子空间,利用数据点的线性自表示,将能够互相线性表示的数据视为同一类,将不同类别的数据视为属于不同的低维子空间的聚类方法。子空间聚类算法可以有效处理较高维度的数据的聚类,其在人脸识别,图像处理和轨迹识别等方面已有广泛的应用。然而,传统的子空间聚类方法精度还不够高;对于数据结构的假设过强
化石燃料的过度使用与开采造成了严重的全球能源危机和环境污染,所以人类急需寻找新型能源来替代化石燃料。氢气是一种高能量密度的清洁能源,是目前最具应用前景的化石燃料替代品。对于传统的工业化制氢方法来说,其具有污染大、能耗高的缺点,所以研究者们需要研发出新型的制氢技术并将其应用到工业化的大规模生产当中。在各种新型制氢技术当中,碱性电解水制氢技术由于其具有对设备要求低、生产过程无污染、产氢纯度高的优点而受
随着显示元器件的发展,图像已逐渐成为人类获取信息的主要来源之一,并且成为人类社会活动中最常用的信息载体。图像分辨率是评价图像质量的重要指标,在很大程度上代表了图像所包含信息的丰富程度。通常图像分辨率越高,意味着人眼可以捕获到更多的信息。然而在现实生活中,由于图像编码(在图像传输、传输和保存中),成像设备和成像环境的局限性等因素,图像经常会出现不同程度的纹理和边缘细节损失,从而导致图像质量的下降。超