肺炎克雷伯菌KP1_4563基因参与Ⅲ型菌毛功能的研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangmingmind
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探究肺炎克雷伯菌KP14563基因对Ⅲ型菌毛功能的影响及cAMP受体蛋白(c AMP receptor protein,CRP)对KP14563基因的调控机制。方法首先,利用同源重组基因无痕敲除技术从肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中敲除KP14563基因,获得突变株Kp-Δ4563,再用pBAD33质粒携带KP14563 DNA片段,导入Kp-Δ4563获得回补株Kpc-Δ4563。采用甘露糖敏感的血凝实验(MSHA),甘露糖抵抗的血凝实验(MRHA),甘露糖结合实验和黏附实验对Kp-Δ4563,Kpc-Δ4563,K2044的表型和毒力进行鉴定,初步判断KP14563基因对肺炎克雷伯菌菌毛功能的影响。接着验证CRP对KP14563的调控,先从转录水平,采用LacZ报告基因融合实验。接着从分子水平,采用凝胶迁移阻滞实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验。全面的阐述CRP对KP14563基因的调控。结果血凝实验结果显示KP14563基因负调控Ⅲ型菌毛的功能,缺失KP14563基因增强肺炎克雷伯菌黏附到甘露糖和A549细胞的能力。LacZ报告基因融合实验显示CRP负调控KP14563基因的转录,凝胶阻滞实验和DNaseⅠ足迹实验表明CRP能直接结合到KP14563基因启动子区-85到-49 bp之间的序列上(以翻译起始位点为+1)。结论KP14563基因负调控Ⅲ型菌毛的功能,CRP通过直接结合到KP14563基因的启动子区,负调控KP14563基因的转录。
其他文献
矿床的形成与矿区二长斑岩岩体有关 .岩体内发育 4组原生节理或裂隙带 ,这些节理或裂隙带控制了矿体的分布 ,特别是它们的交汇部位是成矿的良好部位 .矿体形态为脉状、网脉状
摘 要:诚信是社会道德规范体系的基础和根本,是社会主义各项事业开展的基本原则。然而,由于社会经济体制转型带来的种种负面影响,近年来高校招生领域腐败丛生,教育失信现象层出不穷。本文在阐述高校招生恪守诚信必要性的基础上,提出了构建我国高校招生诚信机制的举措。  关键词:高校 招生 诚信    近些年,由于经济体制转轨带来的种种不良影响,教育诚信问题已经成为社会舆论的聚焦点,尤其是高校招生诚信问题,引起
本文针对职业院校后勤社会化改革的现状,综合分析存在问题,提出改革的思路、拓宽发展的趋势和需注意解决的问题.
摘 要:学生党建工作是高校学生工作的一项重要内容,同时也是加强和改进大学生思想政治工作的重要性举措。本文通过对当前高校学生党建工作存在问题的分析,指出,我们要积极应对问题,健全学生党员发展体系,加强学生党员入党后的教育管理,抓好学生党建信息化、网络化建设,保障高校学生党建工作健康发展。  关键词:高校 学生党建 工作    高校学生党建工作作为高校党的建设的重要组成部分,在提高高校党组织的凝聚力和
摘 要:随着高等学校办学方向调整和办学规模的不断扩大,无形资产逐渐成为高等学校资产的重要组成部分。同时,由于高等教育布局调整和相关规章制度的缺失,高校无形资产流失问题日渐凸现,其中声誉类无形资产流失问题尤为严重。在本文中,作者将简述高校无形资产分类,分析造成高校声誉类无形资产流失的原因,并提出相应的对策。  关键词:声誉 无形资产 流失 对策    引言    随着高等教育布局结构、高等学校办学方
摘 要:本文结合工作实际,定位高校辅导员在实际工作中的角色,提出了进行创新性工作的探索方法。这对于提高高校思想政治教育工作者的整体素质具有十分重要的意义。  关键词:辅导员 角色定位 创新    高校是培养高学历人才的场所,是培养高素质人才的基地。高校辅导员是学生思想政治工作的骨干力量,其工作是一项以心育心、以德育德的精神劳动,其艰苦在于劳心、劳力、劳智慧,其崇高在于育人、树德、铸灵魂。在实际工作
新课改已谈了几年,素质教育全国也都在抓。但看身边,我总感觉到心虚:学生7:30到校,晚上6:00回家;作业、考试等折磨学生到半夜。望着窗外明媚的阳光,吐绿的柳条……我在想,身为教师,如何让学生心如窗外的天一样呢?那么,新课改和素质教育矛盾吗?我想这是近几年所有教师都在困扰的问题。  有的教师一听说要“减负增效”,认为这是矛盾之想:又要马儿好,又要马儿不吃草。这行吗?我说:这想法不正确。我们是要让马