黄海棠化学成分及其药理活性研究

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黄海棠(Hypericum ascyron L.)是藤黄科(Guttiferae)金丝桃属(Hypericum)植物的全草,别名有红旱莲等。该植物是多年生草本植物,分布广泛,为全草入药,在中医中常被用于治疗创伤、肿胀、头痛、恶心和脓肿等。近年来从黄海棠中分离获得了多种活性物质,经研究发现具有抗肿瘤、抗炎和镇痛、α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化特性,以及抗糖尿病等活性。为了挖掘黄海棠活性物质基础,本论文就安徽安庆产黄海棠的化学成分及其体外细胞毒、抗炎和神经保护活性进行系统研究。本论文一共分为三个部分来介绍。第一部分是关于黄海棠的化学成分研究,并对黄海棠中分离得到的五个新的多环多异戊烯基取代间苯三酚类化合物(Polycyclic polyprenylated Acylphloroglucinols,简称PPAPs)进行分析;第二部分主要是对黄海棠中分离获得的PPAPs类化合物进行药理活性筛选;第三部分是对迄今研究的黄海棠的化学成分及药理活性研究进展进行综述。目的:本次研究是对黄海棠进行提取分离纯化和相关结构鉴定,并对其分离获得的PPAPs类进行体外细胞毒活性、抗炎活性以及神经保护活性筛选,以期为黄海棠药源药效的相关研究和临床应用提供基础依据。方法:通过各种色谱分离技术,如多种柱色谱、薄层色谱、凝胶色谱、半制备高效液相以及高效液相色谱等进行黄海棠化学成分的分离纯化,并利用其理化性质和各种现有机波谱分析技术,如IR、MS、HRESIMS、~1H-NMR、13C-NMR、UV等对分离获得的化合物进行结构的鉴定。最终从黄海棠中分离得到11个化合物(1~11)。药理活性研究部分,首先,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法测定化合物1~4和6~9对皮质酮(CORT)诱导的PC12细胞损伤的神经保护作用。其次,测定化合物1~4和6~9对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞NO的抑制作用来检测其抗炎活性,该实验以非甾体类抗炎药吲哚美辛为阳性对照物质。最后,采用MTT法来对黄海棠中分离得到的化合物1~4和6~9进行了体外的细胞毒活性测试,具体是对Hep3B和SNU-387细胞系的细胞毒性进行了研究。结果:最终从黄海棠的CH2Cl2提取物中分离鉴定了11个化合物,得到5个新的PPAPs,分别记为Ascyrone A(1),Ascyrone B(2),Ascyrone C(3),Ascyrone D(4),Ascyrone E(5),以及6个已知的化合物,分别为Longistylione C(6),Longistylione D(7),Longistylione B(8)和Hyperascyrin N(9),以及山奈酚(10)和桦木酸(11)。在广泛的核磁共振数据分析的基础上阐明了它们的结构,并通过比较它们的实验和计算ECD光谱确定了它们的绝对构型。化合物1-9从结构上来说均含有一个双环[3.3.1]壬烷-2,4,9-三酮核和一个在C-8处的苯甲酰基团,因此都属于B型双环聚戊烯酰基间苯三酚(BPAPs)。神经保护活性实验表明,化合物1在10μM时对皮质酮(CORT)诱导的PC12细胞损伤具有轻度神经保护作用。抗炎活性实验表明,化合物6对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞有较强的抗炎作用,IC50值为3.9±3.3μM。细胞毒活性实验表明,化合物1和9对Hep3B细胞有抑制作用,化合物9对SNU-387细胞也有一定的细胞毒性。结论:本研究的结果可以为黄海棠的传统用途和药理活性测试提供科学支持。我们的数据可能为黄海棠在科研及临床上的应用提供合理依据。
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