第一部分：荷人型淋巴瘤裸鼠“冷抗体”封闭后放射免疫显像、治疗的实验研究 背景与目的：我国淋巴瘤在成人恶性肿瘤中据第八位，其中非霍奇金淋巴瘤(NHL)占80％左右，大多数起源于B细胞，B细胞性NHL传统治疗包括化疗、放疗和骨髓移植，但是多数很难缓解或缓解后又复发，所以针对位B细胞NHL表面抗原CD20而研发出的利妥昔单抗(Rituximab)给患者带来了希望，95％以上的B细胞NHL有CD20抗原的表达，每个肿瘤细胞表面约有50000～200000个位点，易暴露，与单抗结合后不会轻易从细胞膜上脱离，也不会发生调变或内化，通过抗体依赖的细胞毒作用(ADCC)和补体依赖的细胞毒作用(CDC)能有效地杀灭肿瘤细胞，而且淋巴母细胞及成熟浆细胞不表达CD20抗原，所以治疗过程中无明显的毒副作用。 然而十多年的临床应用中，虽然Rituximab作为作为单一治疗或联合化疗显著提高了淋巴瘤患者的总体反应率(ORR)及延长无进展生存期(PFS)，但是仍然有1/3复发的惰性NHL及2/3侵袭性NHL无反应，而且取得疗效的病例仅少数达完全缓解(CR)。因此为了增强抗体的治疗效果，研究者将放射性核素与单抗连接，利用抗体引导核素到靶位点，将产生的β射线选择性的聚集于肿瘤组织，实现内照射治疗(RIT)，使治疗效果明显提高。2002年及2003年美国FDA相继批准90Y—tiuxetan—Ibritumomab(Zevalin)与131I—Tositumomab(Bexxar)上市，两种药物近年来在国外临床研究中取得了令人瞩目的疗效，其中Zevalin在欧洲适应指针由2004年用于复发或难治CD20阳性滤泡型淋巴瘤或转化B细胞NHL，到2008年被欧盟人用药品委员会(CHMP)批准作为滤泡型淋巴瘤一线强化疗法。 Zevalin/Bexxar在单药治疗复发、难治的惰性NHLORR及CR分别为74-92％与15-51％，与单药利妥昔单抗相比，在滤泡性淋巴瘤治疗中疗效明显提高，ORR及CR分别为86％比55％与34％比20％。对于难治性淋巴瘤患者，使用Zevalin与Bexxar无进展期(TTP)分别为8.7月与24.5月。此外在最新的研究中，学者认为Zevalin/Bexxar在NHL造血干细胞移植治疗中可取代TBI，推荐Bexxar与依托泊苷、环磷酰胺联合使用作为清髓处理，与原先方案相比，PFS为68％比53％。然而Zevalin/ Bexxar载体单抗都是鼠源性免疫球蛋白Ibritumomab与Tositumomab，输入人体后可能发生人抗鼠抗体(HAMA)反应及人抗嵌合体抗体(HACA)，据Kaminski MS等报道初诊NHL患者使用Bexxar，HAMA发生率高达63％，虽临床上无明显不良反应，但却大大降低了疗效，基因工程使人源化抗体成为可能，Rituximab就是人鼠嵌合型抗体，尽管仍有部分异源性，但与Tositumomab及Britumomab相比，抗原性已经大大降低了。因此在本实验研究中，采用Rituximab偶联核素131I，相信在治疗应用中应该优于Bexxar及Zevalin。 国内有学者采用淋巴瘤内局部注射131I—Rituximab或直接静脉给131I—Rituximab的实验研究，不足之处是：(1)淋巴瘤是全身性病变，局部注射给药不符合临床；(2)由于外周血游离抗原及脾脏CD20抗原会中和标记抗体，直接静脉给药疗效可能会降低。因此本实验采用“冷抗体”封闭前后再注射131I—Rituximab对荷瘤裸鼠的治疗效果，探讨“冷抗体”封闭后131I—Rituximab是否能够更多的聚集于肿瘤组织，产生更好的显像与治疗效果。此外研究中还探讨了荷瘤裸鼠18F—FDG代谢显像与131I—Rituximab放免显像之间的关系。 方法：建立荷人淋巴瘤裸鼠，病理示B细胞性NHL且肿瘤细胞表面CD20抗原阳性率约95％以上，实验分为分布研究、显像研究与治疗研究，分布研究中将荷瘤裸鼠随机分为3组，每组5只，125I—鼠IgG组、125I—Rituximab组与“冷抗体”封闭后125I—Rituximab组行第2天、4天、7天、11天、16天药物分布计算肿瘤/非肿瘤(tumor/non—tumor，T/NT值)；显像研究中分为18F—FDG组、131I—Rituximab组与“冷抗体”封闭后131/125I—Rituximab组行根据分布数值行PET/CT及SPECT显像；治疗研究中亦将荷瘤裸鼠随机分为5组，每组3只，Rituximab50ug组、Rituximab100ug/只、131I—Rituximab(50ug，0.25mCi)组、“冷抗体”封闭后131I—Rituximab(50ug，0.25mCi)组及空白对照组。给药后观察并测量各组肿瘤生长情况，计算抑瘤率，第16天处死，常规病理分析。 结果：18F—FDG组荷人淋巴瘤裸鼠肿瘤未见明显显像；131I—Rituximab组在瘤/非瘤(tumor/non tumor，T/NT)比值最高期间肿瘤未见显像，而“冷抗体”封闭后131I—Rituximab组在T/NT比值最高期间第7天肿瘤可以显像。治疗研究中“冷抗体”封闭后131I—Rituximab50ug组疗效高于其它各组，组织病理学显示有效。 结论：“冷抗体”封闭后能够使更多的标记单抗到达荷人型淋巴瘤裸鼠的肿瘤，产生的治疗效果最好，优于免疫治疗及未用“冷抗体”封闭的放射免疫治疗。当荷人淋巴瘤裸鼠肿瘤摄取FDG低下时，采用“冷抗体”封闭后放射免疫显像对于优于放射免疫显像。 第二部分：不同病理亚型淋巴对18F—FDG摄取的分析 背景与目的：以往研究表明恶性度越高的淋巴瘤对2-氟-18-氟—2-脱氧—D—葡萄糖(18F—FDG)摄取也越高，本研究对不同病理亚型淋巴瘤患者全身浸润病灶对FDG的摄取情况进行分析，并探讨淋巴瘤FDG的摄取与亚型之间的关系。 方法：回顾性分析102例初诊淋巴瘤患者的影像与临床资料，在PET/CT图象上对每一个单独浸润病灶测取最大标准化摄取值(standardized uptake value，SUV)，再与纵隔血池最大SUV值相比，得出每个患者全身平均肿瘤/纵隔血池比值(tumor SUV max value/mediastinal SUV max value，T/MB)，进而得出各病理亚型淋巴瘤全部患者T/MB平均值。然后分析霍奇金淋巴瘤(Hodgkins lymphoma，HL)与非霍奇金淋巴瘤(non—Hodgkins lymphoma，NHL)，HL与惰性NHL．、侵袭性NHL，NHL中B细胞性非霍奇金淋巴瘤与NK/T细胞性非霍奇金淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤不同临床分期之间差异有无显著性。 结果：：HL与NHL T/MB值分别为4.50±1.54、5.21±2.86(P=0.154>0.05)；侵袭性NHL要远高于惰性NHL、HL(P=0.0006<0.01)；B—细胞性NHL与NK/T—细胞性NHL的T/MB值分别为5.29±3.00与4.91±2.30(P=0.57>0.05)；弥漫大B细胞淋巴瘤不同临床分期之间T/MB值差异无显著性。4例淋巴瘤患者全身大部分病灶无明显FDG摄取，分别是滤泡性淋巴瘤1例T/MB值为0.75；前体T淋巴母细胞淋巴瘤1例为1.02；弥漫大B细胞淋巴瘤2例分别为1.21与1.35。 结论：淋巴瘤全身病灶摄取FDG的高低，与淋巴瘤侵袭性有关，与临床分期无关及B细胞类型或NK/T细胞类型无关。淋巴瘤患者全身大部分病灶无明显FDG摄取并非局限于特定亚型。