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目的: 本研究选择10种肺癌候选TAA(包括TOP2A,ACTR3,RPS6KA5,ACTR3,EEF1G,CD36,ACLY,COPB1,OLA1,PABPC1),以公司购买的重组蛋白作为抗原,检测血清中相应的抗体含量,探究对肺癌诊断的价值及意义。 方法: 1.对前期SEREX方法筛选出的可能与肺癌相关的抗原,利用Oncomine数据库的三个独立队列研究(包括375例非小细胞肺癌和134例正常组织)进行进一步的挖掘,根据校正后的P值,筛选出有共同差异表达的基因。 2.采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肺癌组(n=184)以及正常对照组(n=184)血清中10种TAA自身抗体的含量,比较其在两组血清中的表达水平。对于肺癌诊断有价值较高的4个指标在肺癌组(n=446)、良性组(n=119)及正常对照组(n=446)进行进一步的验证。 3.选取特异度在90%左右,灵敏度最高作为截断值,高于此值为阳性,低于此值为阴性。计算自身抗体的阳性率,分析肺癌患者不同临床资料(TNM分期、病理类型、有无转移、家族史等)对自身抗体水平有无影响,采用筛检实验评价10种TAA自身抗体对肺癌的诊断价值。 4.比较验证组4个TAA与传统肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断的敏感性。 结果: 1.对SEREX鉴定的35个已知功能基因,通过Oncomine分析三个研究中384例非小细胞肺癌和125例正常组织,提取并分析35个基因在非小细胞肺癌组织及正常组织中的mRNA表达差异,在三个研究中筛选出10个共同有差异表达的基因。 2.酶联免疫吸附试验结果:测试组中TOP2A、ACTR3、RPS6KA5、CD36、PSIP1、OLAI6个指标自身抗体的水平及抗体阳性率在肺癌患者血清中均高于正常对照组(P<0.05);验证组中PSIP1、TOP2A、ACTR3、RPS6KA54个指标自身抗体水平及抗体阳性率在肺癌患者血清中均高于正常对照组(P<0.05)。 3.测试组中单个指标对肺癌诊断的灵敏度普遍偏低,在3.8%-32.1%之间,其中灵敏度最高的是PSIP1(32.1%)。验证组4个指标对肺癌诊断的灵敏度在17.0-30.5%之间,说明单个指标对肺癌诊断价值较低。4个指标联合诊断肺癌的灵敏度达到49.0%,AUC为0.701(95%CI:0.670-0.731)。 4.ROC曲线分析验证组中四个指标在肺癌组、肺部良性疾病组和正常对照组中的诊断价值,结果显示4个指标可以将肺癌组与非癌组(肺部良性疾病组和正常对照组)进行鉴别(P<0.05)。 5.验证组临床资料分析,TOP2A指标自身抗体的阳性率在肺癌早期(36.4%)明显高于晚期(16.7%)(P<0.05),ACTR3指标自身抗体的阳性率在肺癌早期(36.4%)明显高于晚期(15.2%)(P<0.05),PSIP1指标自身抗体的阳性率在肺癌有转移患者中(30.0%)明显高于无转移患者(17.2%)(P<0.05),其余年龄、性别、吸烟、饮酒、肿瘤家族史和病理类型因素对各个指标检测肺癌的阳性率均无显著差异(P>0.05)。 6.TOP2A、ACTR3与传统肿瘤标志物(CA125、CEA和CYFRA21-1)联合可明显提高在早期肺癌检测中的阳性率。单独CA125、CEA和CYFRA21-1在诊断早期肺癌中的阳性率分别为20.0%、28.6%和23.5%,其中CEA与TOP2A联合后阳性率最高可达到61.9%。 结论: 1.验证组中PSIP1,TOP2A,ACTR3,RPS6KA54个TAA自身抗体的阳性率明显高于正常对照组,可能是肺癌潜在的生物学标志物。 2.单个指标对肺癌诊断的灵敏度普遍偏低,4个TAA联合传统肿瘤标志物可以明显提高其对肺癌的诊断价值。 3.TOP2A和ACTR3在肺癌早期有一定的诊断价值,有可能作为肺癌早期诊断的标志物。 4.TOP2A、ACTR3和CA125、CEA、CYFRA21-1分别联合时可明显提高在早期肺癌中的检出率。