单纯疱疹性角膜炎(herpessimplexkeratitis，HSK)是由单纯疱疹Ⅰ型病毒引起的角膜病，是目前最常见的也是最严重的角膜病。近年来，此病的发病率有上升的趋势，据统计，它在角膜病中所占的比例已经上升至首位。由于本病具有反复发作，迁延不愈，对药物具有耐药性等临床特点，已成为当前眼科医生最棘手的眼病之一。目前对本病的治疗方案较多，虽然均有一定疗效，但复发率较高。目前对HSK的潜伏和复发机制尚未完全清楚，在预防和治疗上未取得突破性进展。探索HSK的防治方法，降低此病的致盲率，是目前国内外眼科工作的重要研究课题。本研究是在了解国内外防治HSK各种方法的基础上，参阅大量中医药治疗经验，通过体外实验探讨中药制剂-病毒宁对HSK的多点位抗病毒作用。 目的：对病毒宁体外抗单纯疱疹病毒I型的活性进行研究，探讨病毒宁体外抗病毒机制，为临床治疗HSK提供高效、抗复发药物。 方法： 1培养金黄地鼠肾传代细胞BHK-21和HSV-1病毒。 2通过病毒毒力和药物毒性测定，确定病毒半数感染剂量(TCID50)以及药物对细胞最大无毒浓度TD0。 3将100TCID50HSV-1病毒与等量不同稀释浓度的TD0药液进行混合培养，观察细胞病变情况，探讨病毒宁对HSV-1的直接杀灭作用，并与无环鸟苷进行比较。 4将不同稀释浓度的TD50药液与生长旺盛的BHK-21进行混合培养2h后，再与100TCID50HSV-1病毒混合培养，观察细胞病变情况，探讨病毒宁对HSV-1感染细胞的阻断作用，并与无环鸟苷进行比较。 5将100TCID50HSV-1病毒与细胞在室温作用2小时后，加入含有不同浓度TD0药液的维持液混合培养，通过观察细胞病变情况，探讨病毒宁对HSV-1增殖的抑制作用，并与无环鸟苷进行比较。 结果：中性红染色法测得病毒宁和无环鸟苷对细胞最大无毒浓度分别为1.5g/L和62.5mg/L，病毒半数感染剂量(TCID50)为10-7。在不同加药方式下，病毒宁与无环鸟苷都能表现出对病毒的直接杀伤作用并能抑制病毒吸附后的复制增殖过程，这些作用总体上随药物浓度升高而增强，其中病毒宁组细胞病变要低于无环鸟苷组，病毒宁预防HSV-1作用强于无环鸟苷。 病毒经药物处理后攻击细胞的实验结果显示：病毒宁组与HSV-1组比较有显著性差异(P＜0.05)，病毒宁组与无环鸟苷组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明病毒宁对HSV-1的直接杀灭作用效果明显强于无环鸟苷；病毒宁ID50为0.0815g/L，无环鸟苷ID50为9.23，无环鸟苷TI为8，病毒宁TI为36.92是无环鸟苷的4.6倍，说明病毒宁在抗HSV-1病毒作用上属于高效低毒药物，对细胞的安全性也高于无环鸟苷； 病毒攻击经药物处理后的细胞实验结果显示：病毒宁组与HSV-1组比较有显著性差异(P＜0.05)，病毒宁组与无环鸟苷组比较无显著性差异(P＞0.05)，说明病毒宁对HSV-1侵入细胞有阻断作用，但作用与无环鸟苷无显著性差别；病毒宁ID50为0.325g/L，无环鸟苷ID50为31.25g/L，无环鸟苷TI为4，病毒宁TI为9.23是无环鸟苷的2.3倍，表明病毒宁在阻断HSV-1侵入细胞繁殖方面属于低毒，对细胞的安全性也高于无环鸟苷； 病毒攻击细胞后加药结果显示：病毒宁组与HSV-1组比较有显著性差异(P＜0.05)，病毒宁组与无环鸟苷组比较有显著性差异(P＜0.05)，说明病毒宁能阻断HSV-1的生物合成，而且阻断效果强于无环鸟苷；病毒宁ID50为0.1625g/L，无环鸟苷的ID50为15.625g/L，无环鸟苷TI为8，病毒宁TI为18.46是无环鸟苷的2.3倍，说明病毒宁在阻断HSV-1生物合成作用方面对细胞的安全性要高于无环鸟苷。 结论：通过病毒宁在体外对HSV-1多个作用方式的实验研究可以看出，病毒宁对HSV-1不但有强大的直接杀灭作用，而且还能阻断病毒进入细胞进行繁殖和抑制HSV-1的生物合成的作用，同时药物的有效安全效范围要比无环鸟苷大。