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多囊卵巢综合征患者由于存在排卵障碍,子宫内膜在长期低雌激素作用下往往处于不同程度的增殖阶段,对雌孕激素的敏感性降低,可能影响胚胎着床。在应用促排卵方法时,发现排卵率高,妊娠率低,子宫内膜的反应性下降可能为其原因之一。部分经各种不孕治疗仍不能怀孕或合并其它不孕因素的PCOS患者,往往会采取IVF或者IVM解决生育问题。而冻融胚胎移植技术的发展,可以将IVF或IVM过程中产生的过多胚胎或由于IVF超促排卵所致卵巢过度刺激综合征暂不能移植的胚胎冻存起来,留待下次移植。因此,PCOS患者如何准备内膜,使其具有最佳的容受状态,也是有待解决的一个问题。 子宫内膜的容受性是妊娠成功的一个重要因素。传统的评估方法是根据大体的组织学分期来确定是否为分泌中期,最近的研究已显示一些内膜蛋白的表达能更好的显示着床期子宫内膜的功能状态。整合素家族是一族由α和β两个亚单位通过非共价键结合而构成的跨膜糖蛋白,参与各种细胞与细胞、细胞与细胞外基质间的相互作用。整合素在子宫内膜的表达呈周期性,其中,αvβ3在子宫内膜腺上皮中的出现与子宫内膜着床窗的开启一致,是目前公认的子宫内膜容受性标志物,在黄体发育延迟、输卵管积水、轻度内异及不明原因不孕患者的子宫内膜表达减少,并参与滋养层组织——子宫内膜的双向识别过程。动物实验中阻断整合素(αvβ3的表达,将导致胚胎着床的失败。 胚胎着床的关键步骤之一是极滋养层细胞对着床部位细胞外基质的降解。MMPs是锌依赖酶,能水解多种细胞外基质成份,与组织重塑有关,在人体广泛分布。有研究发现子宫内膜分泌MMPs,这些酶可能参与子宫内膜的重建、囊胚种植及滋养层浸润。MMPs的天然抑制物TIMPs,与MMPs有着很高的亲合力,并以1:1结合,调节MMPs的活性。在MMP家族中,MMP-9是参与基底膜降解的重要成员。有研究发现MMP-9及其抑制物TIMP-1在子宫内膜分泌期表达增加,尤其是在子宫内膜种植窗口期呈现强阳性表达,因此推测其与子宫内膜容受 浙江大学硕士学位论文性有关,认为MMP-9、TIMP-l在这一时期的强阳性表达有助于加强蛋白水解酶活性,完成细胞外基质的转化,促进子宫内膜的分化和蜕膜化,使子宫内膜更适合胚胎植入,改善子宫内膜容受性,为胚胎着床做准备。 目前国外有学者以整合素av03和胎盘蛋白为指标,来研究供卵模型中受者经模拟周期治疗后子宫内膜容受性,国内也有学者研究在供卵模型中用低剂量的雌激素准备内膜的效果,但尚未见PCOS患者经性激素治疗后子宫内膜容受性的研究。整合素avp3作为评价子宫内膜容受性的生物标志物,己是公认,而MMP-9强表达于种植窗口期,但尚不是于宫内膜容受性的标志物,两者的相互关系报道甚少。本研究旨在研究PCOS患者性激素治疗后子宫内膜整合素aV03、MMP-9及TIMP-l的表达以评估子宫内膜的功能状态,从而评价性激素治疗的有效性,寻找最佳的性激素替代治疗方案,分析MMP-9与整合素。V03在子宫内膜种植窗口期的表达有否相关性,从而为确定MMP-9是否能作为子宫内膜容受性标志提供一个实验依据。 选择2001年*月至2002年10月在浙江大学医学院附属妇产科医院就诊的PCOS患者41例。以同期就诊的正常生育妇女14例为对照组。PCOS患者随机分为两组,A组与B组。A组:每天注射黄体酮针 20mg,七天后取子宫内膜,同时采血泪组:每天注射黄体酮 20mg,共10天,在撤退性出血的第五天开始予激素替代治疗(每大口服ling补佳乐,共20天,在服用补佳乐的第十一天起每天黄体酮针 20mg,共 10天),在注射黄体酮七天后取子宫内膜,同时采血;对照组采集黄体中期血样及内膜。电于化学发光法测血清EZ、P,阴道B超测子宫内膜厚度,SP免疫组化法测子宫内膜整合素av93、MMP-9、TIMPI及HE染色常规镜检,根据Noyes标准组织学分期。 结果 1.病例组一般情况 病例组 A组与 B组年龄(28.47士2.72 VS 27.36士2.83),BMI 22.36士4.08 VS ZI.98士2.74),LHfFSH(2.85士0.gi VS 3.68士 1.58),T(2.22士 1.50 VS 2刀8土0.95),两组比较差异均无显著性,(均为P>o.05)。 2.性激素治疗后子宫内膜组织学形态 对照组 14例,子宫内膜均处于中分泌期。A组 17例,子宫内膜中分泌期改变门例(占64.7o),与对照组比较,差异有显著性,(P<0.05)。B组24例,子宫内膜中分泌期改变20例(占83.3o),与对照组比较,差异有显著性,(P>0.05)。A组与B组比较,差异无显著性, 3 浙江大学硕土学位论文 (P>0刀5)。 3.(拟)黄体期子宫内膜厚度及血清EZ、P浓度 A组拟黄体中期子宫内膜厚度显著较对照组薄(8刀8士 1.53mm vs 9l 5土 1石gmm),差异有显著性,(P<0.05)。B组拟黄体中期子宫内膜厚度较