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目的:探讨联合谷氨酸脱羧酶(GAD65)、C肽(CP)、胰岛素(INS)等全长胰岛自身抗原进行CD4+T细胞-酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测对自身免疫性糖尿病的诊断价值。方法:选取急性起病1型糖尿病(T1DM)患者43例,健康对昭(Control)40例;ELISPOT检测胰岛自身抗原GAD65,CP,INS反应性IFN-γ分泌性CD4+T细胞斑点数,比较不同抗原及联合抗原T细胞检测诊断T1DM的敏感度和特异度。放射配体法检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、锌转运体8抗体(ZnT8A)等胰岛自身抗体;放射免疫法检测血清C肽。按照T细胞检测和抗体检测的结果将T1DM患者分为T+Ab+、T+Ab-、T-Ab+和TAb"四组,分别比较不同组别患者的体重指数(BMI),糖化血红蛋白(HbA1C),空腹C肽(FCP)及餐后2hC肽(PCP)水平等临床特征。结果:1)T1DM组43例患者中,针对GAD65一T细胞反应阳性率为21.4%(9/42),CP-T细胞反应阳性率为55.5%(20/36),均高于正常对照组[vs.2.5%(1/40)和20%(8/40)],二者均有统计学差异(P<0.05);INS-T细胞反应阳性率为2.4%(1/42),和正常对照组无统计学差异。2)联合GAD65、CP、INS三种抗原ELISPOT检测的T细胞反应阳性率为60.5%(26/43),均高于GAD65和INS反应性T细胞阳性率(均P<0.001)。3)抗体阴性的T1DM患者中有61.1%(11/18)的患者呈T细胞反应阳性。联合T细胞及抗体检测的敏感度为83.7%,高于抗体检测的58.1%及T细胞检测的60.5%(P<0.05)。4)与T细胞反应阴性组比较,T细胞反应阳性组患者FCP及PCP更低(FCP:33.5vs.117.6,P<0.05;PCP:63.1vs.218.0,P<0.01)。5)T+Ab-组患者与TAb+、T+Ab+组患者的BMI. FCP、 PCP及HbAlC等临床特征相似,其FCP及PCP较T’Ab-组患者更差(FCP:35.7vs.255.7;PCP:42.2vs.339.5,均P<0.05)。结论:1)联合多种抗原较单一抗原T细胞检测可以提高自身免疫糖尿病的诊断效率;2)在部分抗体阴性TIDM患者可检测到异常的自身反应性T细胞,联合抗体及T细胞检测可提高自身免疫糖尿病的诊断阳性率;3)T细胞阳性TIDM患者较T细胞阴性患者胰岛p细胞功能更差,其临床表型与抗体阳性TIDM患者相似。