【摘 要】
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迄今为止,人们已经发现多种能够阻断细胞质膜上钙通道开放的天然或合成的药物,其中在多种细胞类型都表现出抑制ROCC的特性的主要有三种:三七总皂甙(PNGs),SK&F96365和CAI,但
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迄今为止,人们已经发现多种能够阻断细胞质膜上钙通道开放的天然或合成的药物,其中在多种细胞类型都表现出抑制ROCC的特性的主要有三种:三七总皂甙(PNGs),SK&F96365和CAI,但是它们也都或多或少的具有抑制VOCC的作用.研究人员选择胰腺腺泡细胞作为筛选体系,原因有两个:胰腺腺泡细胞为非兴奋性细胞,其细胞膜上的钙通道以SOCC为主,并且不存在VOCC(ManuelCancelaGrantC.Churchill&AntonyGalione1999).同时,腺泡细胞内[Ca<2+>]<,i>的升高与腺泡酶原颗粒的分泌相耦连,在细胞内[Ca<2+>]<,i>升高的几秒钟内可引发大量的酶原颗粒分泌,直接测定淀粉酶的分泌就可以间接推测腺泡细胞擀膜钙通道的开放程度.作者的工作主要由两大部分组成:1.应用CCK-8、Beth(Ach的类似物)等能引起SOCC开放的激动剂刺激细胞,同时加入各推断性的SOCC专一抑制剂的顺序.2.应用Fura-2AM比例荧光成像技术,直接测量胰腺腺泡细胞浆[Ca<2+>]<,i>的变化,寻找CCK-8或Beth,引发腺泡细胞产生规则Ca<2+>振荡的最佳浓度,然后在该浓度下与三种抑制剂的不同的梯度分别共作用于细胞,测定其Ca<2+>振荡的变化.这样,根据各推断性抑制剂对Ca<2+>振荡幅度或频率的抑制程度,最终也可以推出一个抑制效应的强弱的顺序.综合实验数据,研究人员:CAI是一种比SK&F96365更好的SOCC抑制剂.
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