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本研究选择南极嗜冷脂肪酶（LIP7195）、南极假丝酵母脂肪酶（CALB）和大肠杆菌甘油脱氢酶（EcogldA）构建协同催化体系制备1,3-二羟基丙酮（DHA）。将LIP7195和EcogldA分别在大肠杆菌中进行表达,并对相关酶进行可溶性表达优化和酶学性能表征。将两种酶和CALB进行配比,构建高效复合酶协同体系催化植物油脂制备DHA的最佳反应体系,主要结果如下:（1）根据大肠杆菌的优势密码子,对Lip7195的编码基因进行优化,使其序列中GC含量由原始序列的46%升高到48%,同时密码子适宜指数CAI值从优化前的0.25提升到0.37。利用pTrc99a载体实现了对目的蛋白LIP7195的异源表达,但目的蛋白大部分以包涵体的形式存在,通过添加多聚氨基酸标签进行融合表达,结果显示融合有多聚精氨酸标签的目的蛋白可溶性改善最为显著。纯化后的重组LIP7195的表观分子量约为35 kDa。重组LIP7195最适反应温度为40℃,最适反应pH为9.0,且在30℃以下,pH 8.010.0范围下,具有较好的稳定性。除了Co2+对酶活有20%的激活作用,Zn2+、EDTA、Triton X-100、Tween-20和SDS对重组LIP7195均有不同程度的抑制作用。重组LIP7195的Km为0.18 mM,Vmax为28.95mM·s-1。相比于其他底物,重组LIP7195对底物对硝基苯酚月桂酸酯有最高活性,比酶活为10.9 U/mg。（2）利用pET-20b载体对EcogldA实现了高效表达,镍柱纯化后的重组EcogldA的表观分子量为40 kDa。甘油和NAD+作为底物和辅酶,重组EcogldA的最适反应温度为70oC,最适pH值为11.0,且在70℃以下和pH 6.09.0条件下具有较好的稳定性重组EcogldA的Km为0.22 M,Vmax为14.69 M·s-1,比酶活为9.4 U/mg。（3）将重组LIP7195、EcogldA和CALB构建高效的复合酶协同体系催化植物油脂制备DHA,其最佳反应体系为:反应温度40℃,pH值为9.0,最适酶配比CALB:LIP7195:EcogldA=28:7:15,总酶量为81 U/g三丁酸甘油酯,反应时间6 h,DHA的最大得率为48.7%,而以玉米油和大豆油为底物,DHA得率分别为32.3%和35.6%。