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背景:颗粒细胞是卵泡的功能细胞之一,在卵泡发育、成熟、排卵及闭锁过程中发挥重要作用,颗粒细胞功能障碍会引起卵泡发育异常、卵泡闭锁等,从而导致排卵异常。多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)作为育龄期女性常见的生殖内分泌疾病,排卵障碍是其主要临床特征之一,因此颗粒细胞功能的异常与PCOS的发生发展密切相关。微小RNA(miRNA)是内源性非编码小RNA,通过靶向mRNA发挥内源性调控作用,在细胞生长、代谢、凋亡等方面有重要作用,并因此而参与多种疾病的发生发展。研究发现多种miRNA在颗粒细胞功能中发挥重要的调控作用,并因此影响卵泡的发育。miR-103a-3p在PCOS患者血清和颗粒细胞中异常高表达,可能与颗粒细胞功能调控有一定的关系,但其分子机制及对PCOS的影响仍不清楚。因此,本文拟以颗粒细胞株为研究对象,通过观察过表达miR-103a-3p对颗粒细胞增殖和凋亡的影响,分析和探讨其可能的作用机制,为阐明卵泡发育异常的分子机制及PCOS病因发病学提供新的实验依据。方法:体外培养KGN细胞株,采用荧光定量PCR(Quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测KGN细胞中miR-103a-3p的表达;将miR-103a-3p mimics瞬时转染至KGN细胞,采用荧光显微镜和qRT-PCR检测miR-103a-3p在KGN细胞中表达情况;采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术、EdU染色、Hoechst染色等分别检测颗粒细胞增殖和凋亡的情况;通过生物信息学和双荧光素酶实验验证miR-103a-3p与靶基因PTEN之间的相互作用;采用细胞免疫荧光技术、Western blotting免疫印迹技术和qRT-PCR检测miR-103a-3p对颗粒细胞PTEN表达的影响;过表达PTEN后,分别采用流式细胞技术、MTT等观察miR-103a-3p对KGN细胞增殖和凋亡的影响。结果:1)qRT-PCR检测发现KGN细胞中存在miR-103a-3p表达,miR-103a-3p mimics可转染至KGN细胞,使细胞中miR-103a-3p的表达明显高于对照组(P<0.05)。2)与miR-control相比,过表达miR-103a-3p明显抑制了颗粒细胞的活性、使细胞阻滞在G0/G1期,细胞凋亡率则明显升高(P<0.05)。3)miR-103a-3p可特异性结合PTEN 3’-末端非编码区(3’-UTR),且KGN细胞在转染miR-103a-3p mimics后,PTEN的mRNA和蛋白的水平明显低于对照组(P<0.05)。4)与单纯miR-103a-3p过表达组比较,miR-103a-3p和PTEN共同过表达组的颗粒细胞增殖能力显著增加,细胞凋亡率则明显降低(P<0.05)。结论:miR-103a-3p可抑制颗粒细胞增殖、促进颗粒细胞凋亡,其机制可能与靶向调控细胞PTEN的表达相关。