论文部分内容阅读
目的:证实在小鼠食管发育过程中存在p75NTR的表达,且表达p75NTR的阳性细胞可能是小鼠食管上皮干细胞/祖细胞。 方法:1.在胎鼠发育过程中按照胎龄的先后,分阶段获取胎鼠食管。对获得的食管进行多聚甲醛常规固定,石蜡包埋,制作石蜡切片。对于胎龄过小的胚胎,采取整体包埋。对于生后的小鼠食管,分离取出后再进行包埋。对切片进行HE染色,寻找每个发育阶段的食管上皮;2.免疫组化Envision法检测p75NTR、CK4和CK14在小鼠胚胎11到18天、生后1到7天、生后2周、生后4周以及成年这些发育阶段在食管上皮的表达及变化情况;3.共聚焦免疫荧光方法检测p75NTR分别与CK4、CK14进行荧光双标,观察二者之间的共表达及变化情况。 结果:1.从HE染色的结果中,我们最早可以寻找到胚胎第11天的小鼠食管上皮。2.p75NTR蛋白在胚胎食管上皮中有表达,主要定位于食管上皮基底层的细胞膜或细胞浆中;CK4主要定位于食管上皮基底层以上的细胞浆中;CK14主要定位于食管上皮基底层的细胞浆中。在不同的发育时期,三者的表达都存在先增加后降低的趋势,且差异具有统计学意义。3.p75NTR与CK14存在共表达情况,位置位于食管上皮的基底层。 结论:p75NTR参与小鼠食管上皮细胞的发育,p75NTR阳性细胞可能是小鼠食管上皮干细胞/祖细胞。