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目的：1)研究锑剂在治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)中的作用,探究锑剂对急性早幼粒细胞白血病相关蛋白的影响,进而证明锑剂具有治疗APL作用。2)通过探讨锑剂对PML突变体(例如A216V和L218P；砷剂耐药性突变体)的降解作用,发现具有更强降解PML突变体的锑化合物。方法：常规培养急性早幼粒细胞白血病NB4细胞后,使用三氧化二锑(简称锑剂)或砷剂(阳性对照)暴露NB4细胞,通过MTT法,瑞氏-吉姆萨染料染色,流式细胞术,Western Blot,免疫荧光等方法检测NB4细胞的增值抑制,分化、凋亡等指标变化。使用免疫荧光法检测锑剂对核小体形成的影响。利用HEK293T或HeLa细胞,转染Flag-PML或Flag-PML-RARa基因,过表达PML或PML-RARa融合蛋白,研究锑剂(或砷剂)对PML蛋白的溶性改变和降解作用。主要以RIPA buffer和LDS buffer分别提取可溶上清蛋白(RIPA可溶部分)和不溶沉淀蛋白(RIPA不可溶部分)。使用Western Blot法分别检测PML和PML-RARa融合蛋白在RIPA可溶和不溶部分中的变化和后修饰变化。结果：1)锑剂对NB4细胞的作用结果；MTT和流式细胞术结果显示,锑剂的细胞毒性明显弱于砷剂,而且锑剂有较强的诱导NB4细胞CD11b的表达(早有粒细胞分化标志蛋白)。同时,还发现锑剂可使NB细胞核形态变化,证明锑剂具有较强的诱导NB4细胞分化作用。随着锑剂暴露浓度的增加,胞形态出现了凋亡的特征,证明锑剂具有一定的诱导细胞凋亡的作用。Western Blot和免疫荧光共聚焦结果显示,锑剂同样可导致PML-RARa融合蛋白的溶性发生改变,最终降解其蛋白融合蛋白；而且出现大颗粒状的PML核小体,并且与SUMO-1共定位于细胞核,提示锑剂可促使PML-RARα融合蛋白进入PML核小体,进而促进融合蛋白的降解,其作用类似于砷剂。2)锑剂对PML或PML-RARa过表达293T细胞体系实验结果；分别用不同浓度的锑剂或不同时间处理PML和PML-RARa过表达293T细胞,锑剂同样能够改变PML或PML-RARa融合蛋白的溶性改变,与NB4细胞实验结果相吻合。3)锑剂和PSO(锑化合物)对PML突变体的作用结果；锑剂和砷剂都无法诱导PML突变体(A216V或L218P)的溶性改变或降解,而新型锑化合物PSO具有较强的诱导PML突变体的溶性发生改变。结论：锑剂具有类似于砷剂诱导急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的分化的作用,并且锑剂的细胞毒性远低于比砷剂。进一步证明锑剂同样能够诱导PML和PML-RARα融合蛋白的溶性改变和降解其融合蛋白。锑剂和砷剂对PML突变体无作用,而新型锑化合物PSO具有较强的诱导砷剂耐药型PML突变蛋白降解,从而证明锑剂作用的广泛性。