柑橘抗溃疡病机理的初步研究

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柑橘溃疡病是柑橘上一类极具毁灭性的检疫性细菌性病害,由地毯草黄单胞柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv. citri, Xac)引起,目前尚无十分有效的根除方法。本研究以罗浮金柑(Fortunella margarita Swing.)、新生系3号椪柑(Citrus reticulata Ponkan)、纽荷尔脐橙(C. sinensis Osbeck)和星露比葡萄柚(C.paradisi Macf.)为研究材料,比较4个柑橘品种对溃疡病的抗性差异,探索叶片微形态结构和生理生化代谢与其抗性关系,力求找到柑橘品种自身抗病因子,为抗病育种提供更好的理论依据。本文主要研究结果如下:1.柑橘品种对溃疡病抗性差异离体针刺接种试验中,罗浮金柑整个观察期未发现典型溃疡病病斑;新生系3号接种7天后(days post inoculation, dpi)的发病率为57.5%,7dpi的病斑大小为0.043cm2;纽荷尔5dpi发病率为83.05%,6dpi完全感病,7dpi的病斑大小为0.0713cm2;星露比5dpi的发病率为97.5%,6dpi完全感病,7dpi的病斑大小为0.175cm2。涂抹接种实验中,10dpi罗浮、新系3号、纽荷尔和星露比的病斑数依次为0、4.3、34和40个。不论是针刺接种还是涂抹接种,4个品种对溃疡病的抗性均存在差异,抗性依次是罗浮>新生系3号>纽荷尔>星露比。2.叶片微形态结构与溃疡病抗性的关系通过电镜观察叶片气孔发现,4个品种的下表皮气孔密度差异达到了极显著,其排列顺序依次为:星露比(762.85个·mm-2)>纽荷尔(550.78个·mm-2)>新生系3号(472.41个·mm-2)>罗浮(386.12个·mm-2),与其抗性成负的对应关系。浸泡接种试验中,分离的菌落数依次是星露比89个,纽荷尔27个,新生系3号7个罗浮1.7个,差异显著。电镜观察气孔形态显示,罗浮和新生系3号保卫细胞内陷,保卫细胞周围蜡质覆盖厚,而纽荷尔和星露比的保卫细胞下陷不明显,周围蜡质覆盖较薄。此外,4个品种的气孔长度及宽度,叶片、栅栏组织、海绵组织、上皮层及下皮层厚度的差异不显著,与溃疡病的抗性关系不明显。3.抗性相关生理生化物质与溃疡病抗性的关系经测定4个柑橘品种接种前后叶片内的叶绿素、MDA及可溶性蛋白含量和CAT、POD、SOD活性及APX活性,统计分析结果显示:健康叶片中H202含量依次为罗浮27.94mg·g-1,新生系3号18.92mg·g-1,纽荷尔19.51mg·g-1,星露比16.68mg·g-1,差异不显著;但接种后,H202含量在罗浮体内7dpi达到最大值32.97mg·g-1,新生系3号5dpi达到最大值29.97mg·g-1,纽荷尔5dpi达到最大值24.59mg·g-1,星露比3dpi达到最大值21.86mg·g-1,H2O2含量总体变化趋势是罗浮>新生系3号>纽荷尔>星露比,与溃疡病的抗性存在相关性;健康叶片内仅有MDA含量、可溶性蛋白含量差异显著,且MDA的含量与溃疡病抗性呈正的对应关系;接种后这些物质的变化趋势与溃疡病的抗性不具明显的关系;但罗浮的H202含量、MDA含量、CAT活性、POD活性及APX活性在接种后总体上均高于其它品种。
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