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研究背景及目的:急性呼吸道感染是儿童感染性疾病中最常见的类型,90%由病毒感染引起,而病毒中以RNA病毒居多。目前除了流感病毒外,其他RNA病毒感染尚无有效的治疗药物,所以探索RNA病毒感染的调控机制,可以为寻求治疗RNA病毒感染的新方法提供理论依据和研究目标。肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(Tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2,TIPE2)是一个最近发现的免疫负调控因子,在先天性免疫应答和获得性免疫应答中均起重要的负向调控作用。然而TIPE2对RNA病毒感染的调节,尤其是TIPE2对RNA病毒感染机体的的信号途径的调控,及TIPE2如何调控信号途径尚未有报道。本研究的目的是探讨TIPE2对RNA病毒感染的调控作用及其相关分子机制。方法:1.以2014年11月至2016年10月因临床确诊呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)(儿童最常见的RNA病毒)感染在我院治疗的患儿154例及66例健康体健儿童为研究对象,检测外周血单个核细胞中TIPE2表达的变化。2.同时在体外细胞水平检测了水疱性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus,VSV)(科研常用的RNA病毒)和RSV感染后巨噬细胞(鼠原代腹腔巨噬细胞、鼠巨噬细胞Raw264.7、经诱导人单核细胞THP-1、经诱导人外周血单核细胞)TIPE2 mRNA和蛋白表达水平的影响。3.通过干扰和过表达实验研究TIPE2对RNA病毒感染的调控作用,通过Western-blot实验探索其如何调控RNA病毒感染巨噬细胞后信号通路的活化情况。结果:1.在临床标本实验中,我们发现RSV感染患儿外周血单核细胞中TIPE2 mRNA表达较健康儿童下调。2.在细胞实验中进一步证实VSV感染原代腹腔巨噬细胞后,TIPE2的表达(包括mRNA和蛋白水平)均可明显下调。VSV感染Raw264.7细胞和THP-1细胞同样可以降低TIPE2的表达。另一种RNA病毒RSV刺激腹腔巨噬细胞TIPE2表达同样下调。3.干扰了巨噬细胞内源性TIPE2后,被VSV感染的巨噬细胞数明显减少,VSV-G基因的表达量也显著下调。而在巨噬细胞内过表达TIPE2能够显著的促进VSV的复制和感染。4.干扰TIPE2的巨噬细胞在RNA病毒感染下能够显著促进I型干扰素和炎性因子的分泌,而过表达TIPE2,则能够显著抑制I型千扰素和炎性因子的分泌。5.TIPE2能够通过抑制TBK1、IRF3信号途径的活化,抑制I型干扰素和炎性因子的分泌。结论:1.在临床标本实验中证实了 RSV(RNA病毒)感染后TIPE2表达下调。2.在细胞实验水平中进一步证实了 RNA病毒感染后TIPE2表达下调。3.TIPE2能够促进RNA病毒的感染与复制。4.TIPE2能够抑制由RNA病毒感染诱导的I型干扰素和炎性细胞因子的产生。5.TIPE2可能通过抑制TBK1、IRF3信号通路的活化来抑制由RNA病毒感染诱导的I型干扰素和炎性细胞因子的产生,促进RNA病毒的感染与复制。