长链非编码RNA CRNDE在膀胱癌的功能研究

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研究背景膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,威胁着全球人类健康,并给膀胱癌患者带来巨大的经济负担。数十年来,虽然膀胱癌的诊断和治疗已经取得了较大的进步,但目前膀胱癌的治疗仍面临众多问题,如副作用多,缺乏精准靶点,五年生存率低,转移率和复发率高。早中期的膀胱癌患者可以采用手术治疗辅助膀胱灌注治疗;晚期膀胱癌患者出现远处转移者通常采用放化疗及姑息治疗,膀胱癌患者的死亡率仍居高不下。因此,探索新的膀胱癌诊断标记物和精确治疗靶点实在是刻不容缓。长链非编码RNA是缺乏编码蛋白能力的转录本,长度大于200nt。研究表明,长链非编码RNA在肿瘤的发生和发展中有不可替代的作用,与肿瘤的生长转移和患者的预后息息相关。在众多长链非编码RNA中,CRNDE在多种肿瘤异常表达,它在肿瘤的发生和发展中扮演着促癌基因的角色,可以显著提高肿瘤细胞的增殖,迁移和侵袭能力。新的研究表明,CRNDE的高表达水平与肿瘤淋巴结转移和TNM分期相关,肿瘤组织中高表达的CRNDE水平与患者的不良预后相关,CRNDE表达水平还可以作为患者总体生存率的一个指标。研究目的研究长链非编码RNA CRNDE在膀胱癌组织的表达水平和临床病理特征的相关性,并检测CRNDE对膀胱癌细胞迁移、增殖和凋亡的影响。实验方法收集术中切除的膀胱癌组织及配对的癌旁组织,提取其总RNA,并利用实时荧光定量PCR来检测长链非编码RNA CRNDE在膀胱癌组织和细胞的表达水平。我们还分析长链非编码RNA CRNDE表达水平与膀胱癌患者临床病理特征之间的联系。为了检测长链非编码RNA CRNDE对膀胱癌细增殖、迁移和凋亡的影响,我们利用小干扰RNA来敲低CRNDE的表达水平和用过表达载体来升高CRNDE的表达水平,再用实时荧光定量PCR方法来检测所选的小干扰RNA和过表达载体是否有效。我们进行了划痕实验和Transwell迁移实验来检测长链非编码RNA CRNDE对膀胱癌细胞迁移能力的影响。我们进行了CCK-8实验和EDU实验来检测长链非编码RNA CRNDE对膀胱癌细胞增殖能力的影响。最后,ELISA实验和流式细胞术则用来检测长链非编码RNA CRNDE对膀胱癌细胞凋亡能力的影响。实验结果和癌旁组织相比,长链非编码RNA CRNDE在54例膀胱癌组织中表达显著上调,且TNM分期较高的膀胱癌组织中CRNDE表达量显著高于TNM分期较低的膀胱癌组织;而CRNDE的表达水平与膀胱癌患者的性别、年龄、组织学分级、肿瘤大小和有无淋巴结转移等其它临床病理特征的相关性无显著性差异。与SV-HUC1细胞比较,5637和T24细胞中的CRNDE表达均显著上调。在膀胱癌细胞中敲低CRNDE的表达水平可以明显抑制膀胱癌细胞的迁移和增殖,并促进膀胱癌细胞的凋亡。在膀胱癌细胞中增强CRNDE的表达水平可以明显促进膀胱癌细胞的迁移和增殖水平,并抑制膀胱癌细胞的凋亡。结论长链非编码RNA CRNDE在膀胱癌组织和细胞中表达显著上调,并与膀胱癌患者的TNM分期有显著相关性,参与膀胱癌的发生和发展进程,可以促进膀胱癌细胞的迁移和增殖,并抑制细胞凋亡。总的来说,长链非编码RNA CRNDE在膀胱癌的发生发展中起着促癌的作用,有希望成为新的膀胱癌诊断和治疗靶点,为未来的膀胱癌精准治疗提供理论基础。
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