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目的1、对Er:YAG激光与高速手机切割牙体硬组织后的牙髓的生物学效应进行比较,评估其对牙髓影响的程度;2、获得Er:YAG激光切割牙体硬组织的高效率而且对牙髓损伤最小的最佳工作参数,并证实Er:YAG激光参数在牙体硬组织切割中的安全性和可行性。方法1、收集成年杂种犬上颌切牙若干,挑选其中完整无龋损者129颗,截去牙根及舌面,依牙位分组,分别测量各组唇面颈部牙体组织颊舌向的厚度,分析各组间厚度的差异。2、与成人上颌中切牙唇面颈部牙体组织颊舌向的厚度相比,按相应比例计算出犬切牙唇面颈部牙体组织切割的深度。3、不同能量和频率的高功率Er:YAG激光和高速手机在水喷雾冷却条件下,在犬切牙唇面颈部按确定深度行牙体预备,Ca(OH)2覆盖,修形,抛光。4、术后72h,所有实验犬行3%戊巴比妥钠前肢皮下头静脉注射全麻,颈外静脉插管灌注固定,灌注完成之后,迅速截取上下颌骨,分离实验牙,立即置于4%多聚甲醛内4℃下固定1周,10%EDTA脱钙3个月,石蜡包埋,5μm连续切片。常规HE染色、免疫组化染色,观察牙髓的形态及组织学变化。5、用Image-pro Plus 6.0软件对免疫组化染色标本进行图像分析,得到各组图像的平均OD值。实验数据经SPSS17.0统计软件用单因素方差分析(One-way ANOVA)和LSD-t检验法进行统计。结果1、牙髓组织形态学改变高速手机组:牙髓组织轻度炎症反应,成纤维细胞增生,毛细血管扩张、充血;激光7.0W组:成牙本质细胞层增生不明显,牙髓深部毛细血管轻度扩张、充血;激光7.5W组:成纤维细胞增生,牙髓深部可见血管扩张,充血;激光8.0W组:成牙本质细胞增生明显,排列紊乱,牙髓深部毛细血管增生伴不同程度扩张、充血,牙髓组织内弥散不同程度的炎细胞。2、TGF-β1在牙髓组织的表达TGF-β1在犬牙髓组织中阳性表达定位于成牙本质细胞胞浆内及成牙本质细胞下层牙髓细胞和血管内皮细胞内。高速手机组:成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞和血管内皮细胞均有阳性表达;激光7.0W组:成牙本质细胞及牙髓成纤维细胞和内皮细胞弱阳性表达;激光7.5W组:成牙本质细胞及牙髓成纤维细胞可见阳性表达;激光8.0W组:激光照射区下方的成牙本质细胞胞核和胞浆呈强阳性表达,牙髓成纤维细胞及血管内皮细胞可见阳性表达。3、定量分析统计学结果表明:F=13.312,P=0.000,高速手机和Er∶YAG激光切割牙体硬组织后,激光7.0W组与其他组相比,平均光密度值显示最低值,差别有统计学意义(P<0.05),而激光8.0W组与其他组相比,平均光密度值明显升高,显示最高值,差别有统计学意义(P<0.05)。激光7.5W组和高速手机组平均光密度值居中,二者之间无统计学差异(P>0.05)。结论1、输出功率为7.0W和7.5W Er:YAG激光与传统高速手机切割牙体硬组织后牙髓组织未见明显损伤,输出功率为8.0W Er:YAG激光切割牙体硬组织可能会对牙髓造成损伤。2、输出功率为7.0W和7.5W Er:YAG激光切割牙体硬组织时可能具有促进牙髓组织修复的潜能。3、输出功率为7.5W Er:YAG激光和传统高速手机切割牙体硬组织对牙髓的影响相似。4、输出功率为7.0W Er:YAG激光对牙髓的影响最小。5、设置适当参数的Er∶YAG激光可用于牙体硬组织的切割,不但切割效率较高,而且对牙髓组织的影响较小。