静脉注射骨髓基质细胞治疗大鼠局灶性脑缺血后的GDNF表达

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目的 检测静脉注射骨髓基质细胞(BMSC)治疗大鼠局灶性脑缺血后的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达,探讨骨髓基质细胞治疗局灶性脑缺血的作用及其机制。 方法 健康Wistar大鼠45只,雌雄不限,随机分为骨髓基质细胞组(治疗组),生理盐水组(实验对照组)和空白对照组。Fridenshtein方法分离培养骨髓基质细胞,免疫细胞化学法鉴定骨髓基质细胞,改良Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)1小时模型。闭塞24小时后,治疗组股静脉注射经BrdU标记的终浓度为3×106个/ml骨髓基质细胞1ml,实验对照组股静脉注射1ml生理盐水,空白对照组股静脉不注射。采用免疫组化法检测并鉴定胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及脑内BrdU阳性细胞的表达,神经功能损伤评分(NSS)检测大鼠神经系统功能。 结果 免疫细胞化学方法鉴定骨髓基质细胞为CD34(-),细胞为椭圆形,胞浆不着色,CD54(+)、CD106(+)、CD44(+),细胞为长梭形,成纤维细胞样,胞膜及胞浆染成褐色。在闭塞后3天、7天、14天GDNF在不同皮质区均有表达,且治疗组不同时间点均高于二对照(P<0.05),在缺血侧半球可以发现大量BrdU阳性细胞,对侧半球也可见少量BrdU阳性细胞,BrdU阳性细胞主要集中在梗死周边区。治疗组和二对照组相比各时间点的神经功能损伤评分均偏小,在闭塞后14天时有显著性差异(P<0.05)。治疗组的神经
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