油菜素内酯对干旱胁迫下棉花转录因子表达及调控影响的研究

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棉花作为一种重要的商业纤维作物,被视为纺织工业的支柱。而目前各种环境胁迫,严重威胁棉花产量,其中,干旱是限制棉花生产的重要因素。油菜素内酯(Brassinolide,BR)作为植物内源激素是一种新型生长调节剂,能够通过对下游转录因子的调节广泛参与植物的多种生理过程,尤其在调节植物生长发育和逆境胁迫响应方面具有重要的作用。表油菜素内酯(EBR)作为油菜素内酯中的一种,在生活中应用广泛,本实验以表油菜素内酯为材料。本实验以“新陆早17”陆地棉(Gossypium hirsutum L.)品种为材料,研究棉花萌发期及幼苗期表油菜素内酯EBR对PEG模拟干旱胁迫下“新陆早17”中转录因子表达的影响,主要结果如下:1.本实验以已报道的棉花中响应干旱胁迫的转录因子为研究对象,采用qRT-PCR检测了不同浓度PEG胁迫对转录因子GhNAC1-6及GbMYB5、GhDREB、GhWRKY40在“新陆早17”种子萌发期不同组织部位的表达,结果表明:(1)胚根中,与对照组相比,转录因子NAC5在5%PEG胁迫2 d时,表达量显著上调;NAC6在2.5%PEG胁迫时,表达量下调。胁迫至第4 d时,所选的9个转录因子表达量都显著下调。胁迫至第6 d时,转录因子NAC4在14.5%PEG胁迫下表达量显著上调,WRKY在10%PEG胁迫下表达量显著上调,而NAC6在2.5%、5%、10%PEG胁迫下表达量都显著下调;(2)子叶中,胁迫2 d时,NAC1的表达在各PEG处理组中均显著低于对照,10%PEG胁迫时,NAC2和NAC3表达量则显著上调。胁迫至第4 d,NAC1在5%PEG胁迫下表达显著上调;NAC2和NAC3在2.5%和14.5%PEG胁迫下表达量显著下调;NAC5在所有PEG处理组的表达均显著低于对照组;MYB在2.5%、5%、14.5%PEG胁迫时表达显著下调。胁迫至第6 d,NAC2、NAC3、NAC5、NAC6及DREB在2.5%PEG胁迫下,表达量上调;NAC4在5%、10%及14.5%PEG胁迫时表达量下调;WRKY在10%和14.5%PEG胁迫下与对照组相比表达上调。以上结果提示PEG胁迫的第4天是转录因子在棉花萌发期响应干旱胁迫较集中的时期。2.EBR浸种后棉花萌发期PEG胁迫下检测转录因子表达,结果表明:(1)子叶中,与PEG处理组相比,只有NAC5在EBR浸种后PEG胁迫条件下表达显著下调,其他转录因子在该条件下表达无显著差异;说明萌发期EBR浸种对转录因子在子叶中的表达影响较小;(2)胚根中,EBR浸种后PEG胁迫条件下,NAC1和NAC3的表达显著上调,DREB的表达显著下调。以上结果提示萌发期EBR浸种可通过NAC1、NAC3、DREB的表达变化调节棉花萌发期受到的PEG胁迫。表明在萌发期,EBR浸种后根受PEG胁迫影响较大,EBR通过转录因子在根部的表达变化增强棉花耐旱性。3.幼苗期PEG胁迫下外源喷施EBR检测转录因子表达及生理指标,结果表明:(1)外源喷施EBR,显著促进棉花幼苗脯氨酸和POD合成,MDA含量下降但无显著差异,SOD及CAT无显著变化,该结果表明在PEG胁迫下外源喷施EBR通过脯氨酸和POD含量变化调节棉花抵御PEG胁迫;(2)PEG胁迫下,外源喷施EBR后,与PEG胁迫下相比,NAC4和NAC5的表达显著升高,说明EBR可能通过NAC4和NAC5的高表达调控棉花适应PEG胁迫;外源喷施EBR及BRZ后,NAC3、DREB、WRKY及MYB表达升高,说明这些基因在BR调控棉花响应PEG胁迫途径中可能发挥负调控作用。
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