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本实验制备以PLGA纳米粒子为载体的人p27kip1基因,转染体外培养的血管平滑肌细胞和自体移植静脉,观察外援性p27kip1基因的表达对血管平滑肌增殖与凋亡的作用。进一步探讨p27kip1的生物学作用。
研究表明:
1.直径300nm左右的PLGA纳米粒子可以扩散至静脉内膜。PLGA纳米粒子可以包载人p27kip1基因,并可以维持持续的体外释放。
2.应用纳米技术包载人p27kip1基因经由移植静脉血管内膜进行基因转染后,可成功地实现p27kip1表达。纳米粒子作为基因载体,有效可行。且p27kip1蛋白的表达可能是在转录后水平实现的。
3.p27蛋白在自体静脉移植手术后表达下降,是引起平滑肌细胞增殖、内膜增生的因素之一。p27kip1蛋白的过表达可以抑制平滑肌细胞增殖,从而抑制了移植静脉内膜的增生。同时指出p27kip1蛋白抑制了移植静脉内膜增生可能是通过抑制平滑肌细胞PCNA、E2F的表达、促进平滑肌细胞的凋亡来实现的。