嗜麦芽假单胞菌（Pseudomonas maltophila）是一种广泛分布于自然界的G-细菌，具有很强的代谢活性及广泛的适应能力，其代谢产物丰富，可产生多种有实用价值的酶，包括蛋白酶、淀粉酶、酪氨酸酶、脂肪酶等。本实验室已成功地从该菌中克隆到编码酪氨酸酶的基因mel，构建了产生具有重要应用价值的黑色素工程菌株E. coli/pWSY，为了进一步提高黑色素的产量，本研究从该菌中克隆到高启动子活性的DNA片段，并以该片段成功地构建了高产黑色素的工程菌株E. coli/pAWS，并尝试了经启动子片段对来自于地衣芽孢杆菌株（Bacillus licheniformis）的蛋白基因的调控。此外本研究还对来自嗜麦芽假单胞菌的8个不同大小和不同启动活性的启动子DNA片段进行了微量量热化学的测定和分析，获得了有意义的结果。 利用启动子探针载体，从嗜麦芽假单胞菌中克隆到在大肠杆菌中具有强启动活性的DNA片段。该启动子探针质粒含有无启动子的cat基因。根据氯霉素抗性筛选转化子，结果得到一高启动活性的pPAS1重组质粒能使大肠杆菌抗1000μg／ml的氯霉素，该质粒上含有一个1.4kb具有启动子活性的DNA片断。杂交试验和SDS—PAGE结果证明该片段是来自于嗜麦芽假单胞菌，其表达产物为22Da的蛋白质。 克隆于pWSY质粒上的mel基因是编码酪氨酸酶的基因，酶切下后再克隆到pPAS1质粒上的启动子片段的下游区域构成E. coli/pAWS工程菌。发酵结果显示，E. coli/pAWS菌株的黑色素产量比E. coli/pWSY提高了70.6％。 进一步研究了pPAS1启动子片段对来自于地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）蛋白酶基因在E. coli中表达的调节作用。将1.4kb的pPAsl片段分别从两个方向插入到pA卫RS一3质粒蛋白酶基因的上游区。结果表明，在E. coli中pPASI片段不能表达地衣芽饱杆菌蛋白酶基因，这可能与不同来源的蛋白酶基因表达模式不同相关。 采用微童里热技术对克隆到的启动子DNA片段进行了启动活性的研究。实验所用仪器为等温型LKB2277微量量热仪。供试的启动子具有不同的活性水平。结果表明，由t热学方法获得的数据十分灵敏地反映出具不同活性的DNA片段传大肠杆菌产生不同的代谢.本实验为检测启动子功能和外源基因的表达提供了一种十分灵敏快捷在线的新手段。虽然热量学方法对活细胞反应系统的测定是非特异性的，但获得的热力学信息对研究启动子活性仍具有重要价值。应用量热学方法研究微生物启动子活性在微t量热学研究领域是一个新的突破。