“快速简便”是现代分子检测技术的发展方向。近年来或基于DNA/RNA生物合成机制，或基于某些具有特殊功能的核酸酶，产生了一系列核酸恒温扩增技术。核酸恒温扩增技术对反应仪器要求低，在某一恒定温度下即可进行反应。这一独特优势，极其适合开发价格低廉、高灵敏度、高特异性的现场诊断产品。本研究对切刻内切酶核酸恒温扩增技术(NEMA)和依赖于核酸序列的核酸恒温扩增技术(NASBA)进行改进，并以沙门氏菌(Salmonella)和单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)为目标菌建立各自的NEMA和NASBA检测方法。　　 对传统NEMA技术引入切刻内切酶识别序列的方法进行了改进，突破了限制NEMA技术应用的瓶颈。传统NEMA反应需要四条引物，本研究创新性的加入模板预处理步骤之后，使得反应只需要两条引物即可，大大提高了检测方法的灵敏度和特异性，所建立检测方法的灵敏度比传统PCR-琼脂糖凝胶电泳检测法高一个数量级。经查阅国内外文献，所作改进尚属首次。　　 传统NASBA检测技术大多以RNA核酸序列为检测目标。本研究尝试建立以DNA核酸序列为检测目标的NASBA技术，改进后的NASBA技术降低了对操作环境的要求，拓宽了NASBA技术的应用范围。同时NASBA技术与核酸薄层层析检测技术(Nucleic Acid Thin-layer Chromatography)的结合，也使得NASBA扩增产物的检测摆脱了对精密仪器的依赖，为技术的普及应用奠定了基础。经查阅国内外文献，所作改进尚属首次。　　 以沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌为目标菌所建立各自的NEMA检测方法和NASBA检测方法具有高灵敏度、高特异性，低成本，操作简单等优点。研究结果表明，NEMA和NASBA检测技术有望在快速检测诊断领域得到应用。