论文部分内容阅读
目的:观测脑出血大鼠脑内表皮生长因子受体(EGFR)及轴突生长相关蛋白(GAP-43)的表达量的变化,探讨染料木素(GEN)处理对脑出血大鼠脑内EGFR及GAP-43表达水平的影响。方法:取健康雄性SD大鼠在立体定位仪下向大鼠尾状核内注射IV型胶原酶+肝素诱导获得脑出血大鼠模型64只,随机分为脑出血组+GEN组。再随机取健康雄性SD大鼠32只,在立体定位仪下向大鼠尾状核内注射等量生理盐水作为假手术组。分组后给GEN组大鼠每天注射染料木素溶液(GEN溶于DMSO配成1g/L溶液,腹腔注射5mg×kg-1×d-1),以等量DMSO代替GEN溶液同期腹腔注射脑出血组及假手术组大鼠。在造模后第1d、7d、14d、28d时以Zeal longa5级神经功能评分法对大鼠神经功能进行评分,评分后在不同时间点每组处死8只大鼠,取脑组织切片,HE染色观察脑组织细胞形态改变,采用免疫组化检测EGFR、GAP-43在大鼠脑出血周围组织中的表达变化情况,Western blot检测各组GAP-43蛋白表达水平。结果:脑出血后大鼠反应迟钝,体重减轻,进食减少,肢体出现运动障碍,Zeal longa神经功能评分值明显增加,GEN处理后,脑出血大鼠神经功能评分下降。假手术组神经功能评分为“0”,脑出血组神经功能评分值较假手术组增加,GEN组神经功能评分值较脑出血组减少。HE染色光镜下观察,假手术组大鼠脑组织无异常改变,脑出血组大鼠脑出血周围组织星形胶质细胞活化增生较GEN组活跃,神经元坏死、脑组织水肿较GEN组明显,组织结构较GEN组更松散。免疫组化检测到表皮生长因子受体(EGFR)阳性表达,脑出血组表达量在第7d时出现峰值,脑出血组较假手术组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时均有显著性差异(P<0.05);GEN组较脑出血组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时有显著性差异(P<0.05)。免疫组化检测到神经轴突再生相关蛋白(GAP-43)表达,GEN组及脑出血组表达量峰值同时在第4d时出现,脑出血组较假手术组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时,均有显著性差异(P<0.05);GEN组较脑出血组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时,均有显著性差异(P<0.05)。Western blot检测到GAP-43蛋白阳性表达,GEN组与脑出血组表达峰值在4d时出现,脑出血组较假手术组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时均有显著性差异(P<0.05);GEN组较脑出血组表达增加,在第1d、4d、7d、28d时差异有显著性(P<0.05)。结论:GEN处理使脑出血大鼠脑内GAP-43表达上调并可能产生了有利于神经轴突再生的作用。