建宁莲子芯中多糖的提取、分离及结构研究

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莲子芯(embryo Loti,Nelumbo nucifera Gaertn)为睡莲科莲属植物莲种子的胚芽,是我国重要的中药之一,具有清心火、退热、降血压、强心等功用。本文对产于福建北部山区的建宁莲子芯多糖(Embryo of the Seeds of Nelumbo nucifera Gaertn polysaccharides , ESP)的提取、分离纯化、纯度鉴定、相对分子量分布、及单糖组成等方面进行了探讨。经国标法测定建宁莲子芯的基本组分表明,冷冻干燥后的建宁莲子芯的化学组成为:总糖为2.3%,总蛋白19.2%,粗脂肪22.7%,灰分17.3%,水分9.4%。探讨了影响ESP提取率的主要因素,采用单因素试验确定出合适的水平,然后在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析法,其结果表明,ESP提取的优化条件为:提取温度82.5℃,浸提时间为4.25h,水料比为45∶1(v/w)时,ESP的得率达到10.32(mg/g)。将超滤法应用于ESP浸提液的纯化和浓缩。选用截留分子质量为5000的超滤膜,超滤压力为0.20MPa,450mL的莲子芯粗提取液中,超滤法与传统的真空热浓缩法所的的多糖均为130mg,但真空热浓缩法所得粗多糖中多糖含量低10%。超滤法有除一些小分子污染物有纯化粗多糖的作用,有利于改善多糖的品质。将用Sevag试剂法除去蛋白后的ESP经DEAE- Cellulose 32柱层析分离得到ESP-Ⅰ、ESP-Ⅱ和ESP-Ⅲ三个组分,采用HPGFC、IC等,对ESP-Ⅰ、ESP-Ⅱ和ESP-Ⅲ三个组分的化学组成及结构做了进一步探讨。实验结果表明,ESP-Ⅰ、ESP-Ⅱ和ESP-Ⅲ分子量分别为2.01×104、7.94×103、2.80×105;硫酸基含量分别为1.523%、2.342 %、24.104% ;ESP-Ⅰ的单糖组成比D-木糖:D-半乳糖:甘露糖为1.00:7.18:0.51;ESP-Ⅱ的单糖组成比D-木糖:L-阿拉伯糖:D-半乳糖:甘露糖为1.00:15.05:8.10:3.05。
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