背景:糖尿病肾病（Diabetic kidney disease,DKD）是糖尿病主要的微血管并发症之一,也是引起终末期肾病（End stage renal disease,ESRD）的主要原因。据报道,国外糖尿病患者DKD的患病率为20%～40%。我国DKD患病率也逐年增长,在社区患者中为30%～50%,在住院患者中为40%左右。目前DKD治疗手段有限,血管紧张素转化酶抑制剂（Angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI）/血管紧张素受体阻滞剂（Angiotensin receptor blocker,ARB）作为常规治疗药物可延缓尿蛋白进展和减少心血管事件。近年来,多项临床研究证实:钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂（Sodium glucose cotransporter 2inhibitor,SGLT2i）类药物除降糖外,还可明显减少肾脏终点事件发生。因此,ACEI/ARB和SGLT2i类药物已被指南推荐用作DKD患者的标准疗法。然而,这两种药物对肾脏保护作用的分子机制仍不清楚,是否具有协同作用也未阐明。目的:利用单细胞测序技术明确ARB和SGLT2i类药物是否具有协同效应,同时初步探讨这两类药物对肾脏保护作用可能的分子机制。方法:利用db/db雄性小鼠构建2型糖尿病肾病模型,以db/m雄性小鼠作为其正常对照,通过灌胃的方式分别每天给予小鼠以生理盐水、达格列净、厄贝沙坦或达格列净联合厄贝沙坦干预8周。每周监测体重、血糖及血压等生理指标,8周后收集各组小鼠随机尿,检测尿蛋白/肌酐的比值。处死前收集24小时尿液,检测24小时尿总白蛋白。麻醉后取血检测血肌酐等生化指标。深度麻醉后处死小鼠提取肾脏,制备肾脏单细胞悬液送10×Genomics进行单细胞转录组测序,并进行差异基因（Differentially expressed gene,DEG）和基因本体（Gene ontology,GO）等分析,剩余样本提取肾脏组织包埋进行糖原染色（Periodic Acid-Schiff stain,PAS）、免疫荧光等组织染色,将肾脏固定在电镜保存液中进行扫描电镜观察肾脏超微结构,提取肾脏组织RNA进行RT-PCR等进一步验证分析的结果。结果:db/db小鼠血糖显著高于db/m小鼠,相比于ARB单药干预组,SGLT2i和SGLT2i联合ARB干预组血糖显著降低。db/db组UACR显著高于db/m组,在各组干预后UACR和24小时尿蛋白都明显降低。肾脏单细胞测序结果显示:总共得到了10个不同的肾脏细胞类型,其中主要是近端肾小管（Proximal tubule,PT）细胞。分析发现:ARB特异性调节的基因主要与炎症和纤维化有关,而SGLT2i特异性调节的基因主要与线粒体功能密切相关。另外,通过进一步分析PT细胞还发现了一个新的PT细胞亚群,未干预组数量明显增加,ARB和SGLT2i单药或联合干预后显著降低。免疫荧光显示:新亚群细胞特异性标记物（APOC3,GC和KCNK1）在PT细胞中共定位良好,且db/db小鼠和DKD患者中这些标记物表达均增加,而药物干预后降低。结论:ARB和SGLT2i类药物可明显改善DKD小鼠肾功能,ARB和SGLT2i可能在保护肾脏中发挥叠加效应而非协同效应。ARB具有更多的抗炎和抗纤维化作用,而SGLT2i在PT中更多的影响线粒体功能而发挥肾脏保护作用。另外,我们发现并验证了一个新的PT细胞亚群,这群细胞可能参与DKD的发生发展,为DKD的发病机制提供了新见解。