一种用于磁共振成像及靶向药物递送的多功能纳米簇的制备

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目的:通过一步超声技术制备多功能纳米簇Fe3O4@F127@FA,用于磁共振成像和药物靶向递送。方法:首先,制备了油酸(OA)包裹的Fe3O4纳米颗粒,然后使用嵌段共聚物Pluronic F127或叶酸(FA)共轭的Pluronic F127通过简便的超声处理后将疏水性纳米粒子改性为亲水性Fe3O4@F127纳米簇或Fe3O4@F127@FA纳米簇。通过透视电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱分析(FTIR)与紫外可见光谱分析对多功能纳米团簇的形貌、结构和性能进行了表征。MTT实验和细胞凋亡实验评估了多功能纳米团簇的毒性。激光共聚焦显微镜观察(CLSM)和电感耦合等离子体(ICP)分析验证了多功能纳米团簇纳米团簇具有靶向药物传递的能力。结果:1. Fe3O4@F127@FA纳米簇的成功合成及表征通过TEM可以清楚的观察到Fe3O4@F127@FA纳米簇的形态,可以看到每一个集合体都是由多个Fe3O4纳米颗粒组成。红外光谱分析和紫外可见光谱分析的结果证明了FA与F127的成功结合。在3.0T MRI扫描下,计算Fe3O4@F127纳米簇和Fe3O4@F127@FA纳米簇的横向弛豫率(r2)值分别为406.13 m M-1s-1和401.83 m M-1s-1,表明我们的多功能纳米簇具有良好的T2对比增强效果。阿霉素(DOX)作为模型药物负载到Fe3O4@F127@FA纳米簇,通过上清液颜色的变化计算得到DOX的载药量为14.07 wt%,在30 h内DOX释放率可达30%,说明Fe3O4@F127@FA@DOX纳米簇具有较高的载药率和良好的控释性能。2. 多功能纳米簇无明显细胞毒性MTT结果显示,Fe3O4@F127@FA纳米簇与Hep G2细胞孵育24 h后,仍具有较高的细胞活力,与正常对照组细胞相比,没有明显的差异。流式细胞分析结果显示,Hep G2细胞与纯DEME培养液、浓度为40μM的Fe3O4@F127纳米簇和Fe3O4@F127@FA纳米簇共同培养24 h后,Hep G2细胞的凋亡率分别为2.97%,2.98%和3.037%。3. Fe3O4@F127@FA纳米簇在肿瘤细胞中具有良好的T2磁共振增强效果在体外,与Fe3O4@F127@FA纳米簇共同培养的Hep G2细胞的T2加权MR图像显示,随着Fe浓度的增加,MR图像逐渐变暗,T2信号逐渐变低,证明了多功能磁性纳米簇在细胞水平作为T2增强对比剂的应用潜力。4. Fe3O4@F127@FA纳米团簇具有靶向药物递送的能力将Fe3O4@F127@FA@DOX纳米簇与Hep G2细胞孵育后,激光共聚焦显微镜可以清楚的显示纳米材料在细胞内的位置,与对照组Fe3O4@F127@DOX纳米簇相比,负载DOX的纳米团簇显示出更强的荧光强度。电感耦合等离子体分析(ICP)可以量化细胞内铁含量,相同浓度下,与Fe3O4@F127@FA纳米簇孵育的Hep G2细胞内铁含量高于Fe3O4@F127纳米簇组,表明纳米簇经FA修饰后靶向增强了细胞内吸收。结论:本文通过简便的一步超声技术制备了多功能纳米簇Fe3O4@F127@FA,同时装载疏水性药物实现靶向药物递送,在T2加权MRI中表现出良好的灵敏度,因此适用于疏水性药物的系统给药和MRI诊断。
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