不同HBV感染自然史状态患者外周血炎症因子及CD8~+T细胞表面抑制性受体的差异研究

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目的:研究各类抑制性受体在不同状态HBV感染患者CD8~+T细胞中表达差异以及炎症因子IL-10、TGF-β在不同状态HBV感染患者血清中的差异。对象和方法:1.研究对象筛选2017年6月-2017年12月在南昌大学第一附属医院感染科门诊和住院部就诊的慢性HBV感染者80例,健康体检者10例作为对照组。结合临床资料将慢性HBV感染者按其自然史分为四组,分别为:免疫耐受组,免疫清除组,免疫控制组,再活化组。病例筛选、入组参照2015版慢性乙型肝炎防治指南。2.研究方法:用肝素抗凝管收集入组者外周血2-4ml,淋巴细胞分离管分离PBMCs和血清;记录入组者年龄、性别、肝功能、乙肝五项、HBVDNA、肝脏Fibro touch等临床资料情况;PBMCs行流式检测CD8~+T细胞表面抑制性受体PD-1,CTLA-4,TIM-3,LAG-3的表达;血清用于检测IL-10和TGF-β含量。数据的统计学处理采用SPSSl3.0统计软件包及Graph Pad Prism 5软件进行统计学分析。结果:1、慢性HBV感染者外周血CD8~+T细胞表面表达PD-1,CTLA-4,LAG-3,TIM-3较健康对照组高。2、各抑制性受体在不同状态HBV感染者外周血CD8~+T细胞表面表达比较:PD-1在免疫耐受组和再活化组中表达较高;CTLA-4在不同HBV状态感染组中未发现表达差异;LAG-3在免疫耐受组高于其他慢性HBV感染组;TIM-3在免疫控制组低于其他慢性HBV感染组。3、不同状态HBV感染者外周血CD8~+T细胞表面各抑制性受体表达比较:免疫耐受组:LAG-3>TIM-3>PD-1和CTLA-4;免疫清除组:LAG-3>TIM-3>PD-1,LAG-3>CTLA-4;免疫控制组:LAG-3>PD-1、CTLA-4、TIM-3;再活化组:LAG-3>TIM-3>PD-1和CTLA-4。4、TGF-β在慢性HBV感染者免疫清除、再活化组外周血中含量较免疫控制组和健康对照组升高。IL-10在慢性HBV感染者免疫耐受、免疫清除、再活化组外周血中含量较免疫控制组和健康对照组升高。结论:1、慢性HBV感染者外周血CD8~+T细胞表面抑制性受体表达上调;2、不同的抑制性受体在不同HBV感染状态中表达存在差异,各抑制性受体可能在不同HBV感染状态发挥着不同的主次作用。3、LAG-3在慢性HBV感染CD8~+T细胞中表达明显高于其他抑制性受体,应重视LAG-3通路在HBV感染慢性化中发挥的作用。4、TGF-β和IL-10在慢性HBV感染者免疫清除、再活化组外周血中含量升高,其与HBV感染的关系仍需进一步深入研究。
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