第一部分母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β/Smad信号通路预防小鼠支气管哮喘目的研究雾化吸入母牛分枝杆菌对小鼠支气管哮喘的预防作用,探讨其可能作用机制。方法24只雌性BALB/C小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和预防组(C组),每组8只。B、C组予鸡卵清蛋白制作哮喘模型;A组予PBS液替代鸡卵清蛋白。哮喘模型制造前30天C组雾化吸入母牛分枝杆菌(商品名:微卡),每天1次,连续5天;A、B组雾化吸入PBS液,每天1次,连续5天。各组小鼠在末次雾化后24h内予无创肺功能仪检测气道反应性,处死小鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(Bronchoalvelar lavage fluid,BALF)。BALF 行细胞计数及分类计数;HE染色和PAS染色观察气道炎症;免疫组化检测TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β1、TβR1、Smad1、Smad7的表达;流式细胞术检测γδTCR+ CD3+、IL-13+CD3+、TGF-β+CD3+T 淋巴细胞百分数及 IL-13+γδTCR+CD3+细胞、TGF-β+γδTCR+CD3+T淋巴细胞百分数。结果C组小鼠肺泡灌洗液中细胞总数、嗜酸性粒细胞比例、淋巴细胞比例明显低于B组(P<0.01);肺组织TGF-β1、TβR1、Smad1蛋白表达量均低于B组(P<0.01);流式细胞术yδTCR+ CD3+T淋巴细胞、IL-13+CD3+T细胞占CD3+T细胞百分比均明显低于B组(P<0.01)。三组小鼠TGF-β+CD3+T细胞、IL-13+γδTCR+ CD3+T淋巴细胞组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论实验剂量微卡雾化吸入可预防小鼠支气管哮喘,其机制可能与调节T细胞亚群分布、下调TGF-β/Smad信号通路TGF-β1、TβR1、Smad1蛋白有关。第二部分母牛分枝杆菌雾化吸入调控T细胞亚群和TGF-β/Smad通路预防小鼠RSV感染目的研究雾化吸入母牛分枝杆菌对小鼠RSV感染的预防作用,探讨其可能作用机制。方法24只雌性BALB/C小鼠随机分为正常对照组(A组)、RSV感染组(B组)和预防组(C组),每组8只。B、C组予RSV滴鼻制作RSV感染模型,C组在造模前30天雾化吸入微卡,每天1次,连续5天。在RSV感染后第4天处死小鼠,电镜检测肺RSV感染情况;HE染色观察气道炎症;免疫组化检测TGF-β1、TβR1蛋白表达;流式细胞分析术检测yδTCR+CD3+、IL-13+CD3+、TGF-β+CD3+T 淋巴细胞百分数及IL-13+yδTCR+CD3+、TGF-β+γδTCR+CD3+ T 淋巴细胞百分数。结果较B组相比,C组电镜下RSV感染明显减少;HE染色炎症明显减轻;免疫组化显示肺组织TGF-β1、TβR1蛋白表达量下降;肺γδTCR+CD3+、IL-13+CD3+、TGF-β+CD3+、IL-13+γδTCR+CD3+、TGF-β+yδTCR+ CD3+T淋巴细胞百分数明显下降。结论雾化吸入实验剂量母牛分枝杆菌可以预防小鼠RSV感染,其机制可能与其调控T细胞亚群和TGF-β/Smad信号通路、抑制IL-13和TGF-β1分泌有关。