【摘 要】
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目的:研究TGF-p]是否可通过介导miR-21的表达来参与乳腺癌的发生发展。方法:不同浓度(0,1.25,2.5,5,10ng/mL)或不同时间的TGF-β1 (0,6,12,24,48,72 h)干预人乳腺癌MCF-7细胞株
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目的:研究TGF-p]是否可通过介导miR-21的表达来参与乳腺癌的发生发展。方法:不同浓度(0,1.25,2.5,5,10ng/mL)或不同时间的TGF-β1 (0,6,12,24,48,72 h)干预人乳腺癌MCF-7细胞株,用茎环实时荧光定量聚合酶链反应法(Stem-loop real-time PCR)检测miR-21的表达变化情况;分别用real-time PCR和免疫组织化学SP法检测37例乳腺癌中miR-21和TGF-β1的表达情况;分别用TGF-β1 TGF-β1同时转染miR-21 inhibtitor或阴性对照分子来处理MCF-7细胞,观察细胞形态学变化情况,然后用Western-blot检测miR-21靶基因PTEN蛋白在各处理组中表达差异。结果:实时荧光定量PCR法检测miR-21表达的敏感性和特异性良好,MCF-7细胞中miR-21的表达随TGF-β1作用呈浓度和时间依赖性;乳腺癌组织中miR-21的表达与淋巴结转移及TGF-β1的表达程度相关(P<0.05),而与组织学类型、ER、PR、Her-2及E-cadherin表达等其他病理学指标无关(P>0.05);TGF-β1处理MCF-7细胞后,PTEN蛋白表达较空白对照组明显下调,而转染miR-21 inhibtitor后PTEN蛋白表达明显上调。结论:TGF-β1使乳腺癌细胞MCF-7中miR-21表达上调,且二者表达在乳腺癌组织中显著相关;TGF-β1可通过介导miR-21表达上调导致其靶基因PTEN下调,可能在乳腺癌的发生发展中起重要作用。
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