电针联合雪旺氏细胞移植对大鼠脊髓损伤后轴突再生和再髓鞘化的作用

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目的通过观察电针联合雪旺氏细胞(SCs)移植干预对脊髓压迫性损伤(CSCI)后轴突再生及再髓鞘化的影响,探讨电针联合SCs移植对脊髓损伤的修复作用及机制方法Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、电针组(EA组)、雪旺氏细胞组(SC组)、电针联合SCs移植组(EA+SC组),每组33只。本实验采用自制脊髓压迫性损伤模型,对照组仅造模,不治疗;EA组大鼠造模成功后次日起给予双侧“足三里”、“三阴交”电针干预治疗,SC组术后1周进行SCs移植治疗,EA+SC组给予电针和SCs移植治疗,各组均在干预0、2、4、8周后取材。免疫荧光观察SCs移植后的存活、迁移及髓鞘形成,EdU和Tunel染色分别观察SCs的增殖和凋亡,BDA神经示踪标记再生轴突,WB检测损伤局部组织中免疫排斥相关蛋白CD4、CD8及髓鞘蛋白P0的相对表达量,BBB评分评定大鼠的运动功能。结果干预2周后,与SC组相比,EA+SC组Hoechst 33342标记存活的SCs数量显著增加(P<0.05),其迁移距离显著增加(P<0.05)。治疗8周后,EdU和Tunel荧光结果提示:与对照组相比,EA+SC组里增殖的SCs数量显著升高(P<0.05),而凋亡的SCs数量明显降低(P<0.05)。WB提示:干预第8周时,EA组P0蛋白水平明显高于对照组(P<0.05);第4、8周时,SC组P0蛋白水平明显高于对照组(P<0.05,P<0.001);第2、4、8周时,EA+SC组P0蛋白水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.001)。与对照组比较,SC组CD4、CD8蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.05);与SC组比较,EA+SC组CD4、CD8蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.05)。与对照组相比,EA+SC组治疗8周后BDA标记的再生轴突分布较密集,连续性明显增加,且BDA轴突的表达量著增加(P<0.05)。EA组和EA+SC组大鼠治疗8周后BBB评分显著高于对照组(P<0.05,P<0.001)。结论电针可能通过降低SCs移植后脊髓组织内CD4、CD8的表达,提高SCs的存活、增殖及迁移能力,并减少SCs的凋亡,加强CSCI后轴突再生及再髓鞘化,促进CSCI后神经运动功能恢复。
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