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目的:急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是一种发病率和死亡率较高的疾病,其特征之一是严重的肺水肿,位于肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells,ATⅡ)顶膜侧的上皮钠通道(epithelail sodium channels,ENaC)对完成肺泡腔内钠水转运和水肿液清除至关重要。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有调节组织损伤的免疫反应并促进体内修复的能力,并已被建议作用于多种肺疾病(其中包括ALI),MSCs能够释放多种细胞因子和生长因子,外泌体和微小RNA(microRNAs,miRNAs)等。MiRNAs在生物过程中发挥重要调控作用,此外,它们还与一些肺部疾病的发病机制有关。我们推测小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可能通过miRNAs影响ATⅡ中ENaC的功能,从而对ALI发挥治疗作用。本实验旨在探讨miRNAs与ENaC之间的关系,明确其是否影响Na+的跨膜转运并探讨其可能的分子机制。研究方法:1、通过CCK-8细胞生存率实验检验BMSCs对H441细胞生存能力的影响。2、用Western blot实验检验BMSCs对ATⅡ细胞ENaC和10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白水平的影响,并通过qRT-PCR实验检测BMSCs对ATⅡ细胞ENaC mRNA水平的影响。3、采用尤斯灌流技术分析BMSCs对H441单层细胞短路电流的影响。4、用qRT-PCR实验检验BMSCs与ATⅡ细胞共培养,ATⅡ细胞miR-130b表达的变化情况以及miR-130b模拟物和抑制剂的转染效率。5、用Western blot实验确定miR-130b和转染了miR-130b模拟物的BMSCs对ATⅡ细胞ENaC和PTEN蛋白水平的影响。6、应用小干扰RNA特异性敲减ATⅡ细胞中PTEN,用Western blot实验检测miR-130b是否通过靶向作用PTEN影响ENa C蛋白表达水平。结果:1、BMSCs能够提高H441细胞生存能力。2、BMSCs能够在蛋白水平上提高ATⅡ细胞中α-,γ-ENaC的表达水平和降低PTEN表达水平,并能在转录水平上提高ENaC的表达水平。3、BMSCs能够增强H441细胞阿米洛利敏感性电流,这表明BMSCs能够增强ENaC的活性。4、qRT-PCR结果显示BMSCs与ATⅡ细胞共培养,可以提高ATⅡ细胞中miR-130b的表达。5、MiR-130b模拟物和其抑制剂有较高的转染效率。6、MiR-130b和转染了miR-130b模拟物的BMSCs可提高ATⅡ细胞α-,γ-ENaC蛋白表达水平和降低PTEN蛋白表达水平。7、敲减PTEN后,ATⅡ细胞α-ENaC和γ-ENaC的蛋白表达增强。结论:BMSCs可能通过miR-130b靶向作用PTEN对ENaC产生影响,从而对ALI有一定治疗作用。