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目的: 观察自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植术治疗角膜缘干细胞失代偿的有效性与安全性。 方法: 采用前瞻性研究方法,对2017年4月至2017年11月在同济医院住院治疗的角膜缘干细胞失代偿患者随访观察。所有患者由同一位医师诊断为角膜缘干细胞失代偿,均采用自体角膜缘干细胞移植联合羊膜移植的手术方式治疗。其中3例为单眼完全性角膜缘干细胞失代偿,采用对侧眼来源的角膜缘干细胞;8例为单眼部分性角膜缘干细胞失代偿,采用同侧眼来源的角膜缘干细胞。利用裂隙灯显微镜照相、眼前节OCT、活体角膜共焦显微镜、印记细胞学、临床病理学检查,并记录术前、术后2周、1个月和3个月的视力、新生血管面积及其并发症,观察随访3-10个月。 结果: 共计11例患者纳入本研究中,其中6例碱烧伤,2例热烧伤,2例爆炸伤, 1例乳头状瘤。术前视力为HM/30cm-0.5,平均0.16±0.15。新生血管面积为11.19-91. 89mm2 ,平均52.38±26.23mm2。眼前节OCT结果显示术前角膜厚度367-634μm,平均474.36±77.96μm,角膜前覆盖的血管膜厚度为100-286μm,平均180.30±76.83μm。目前11例患者均完成3个月随访,1例患者术后2个月失随访。术后患者角膜中央区透明,视力FC/50cm-0.6 ,平均0.29±0.21(p=0.04),术后与术前视力存在差值。新生血管面积平均24.22±17.60mm2(p=0.01),术后3个月角膜厚度402-580μm,平均508.00±91.60(p=0.39)。2例患者术后3个月角膜血管膜仍覆盖约1/3角膜大小,其中1例再次行自体角膜缘干细胞角膜缘移植联合羊膜移植术,干细胞植片取自对侧健眼。1例患者术后3个月时因角膜混浊行角膜移植术。术前7例患者完成双眼行活体角膜共焦显微镜检查,患眼浅层基质细胞数约397.40-709.50个,平均519.09±101. 86个;正常眼浅层基质细胞数约657.20-847.20个,平均724.04±82.83个,(p﹤0.0 5);患眼中层基质细胞数约365.80-582.40个,平均449.43±80.04个;正常眼中层基质细胞数约503.0-752.4个,平均620.95±96.48个(p﹤0.05);患眼深层基质细胞数约317.70-535.40个,平均390.90±63.31个;正常眼深层基质细胞数约382.40-594.20个,平均499.5±70.34(p﹤0.05);患眼内皮细胞数约1006.80-2343.20个,平均157 3.71±477.46个。正常眼内皮细胞计数约2217.80-3335.70个,平均2873.34±419.07个, (p﹤0.01)。3例患者因角膜血管膜面积大等原因,未能完成共焦显微镜检查。印记细胞学检查提示术前角膜杯状细胞数量增多,上皮细胞鳞状化生,术后角膜杯状细胞及鳞状上皮细胞减少。术中切除角膜血管膜制作蜡块切片,行免疫荧光检查,选用C K3、CK12、CK13及P63α抗体,实验结果提示血管膜主要表达结膜上皮相关的角蛋白,少量表达角膜上皮相关的角蛋白,几乎不表达角膜缘干细胞相关抗体。1例患者随访期间再次出现角膜缘干细胞失代偿,其余患者未见复发。 结论: 对单眼完全性或者部分性角膜缘干细胞失代偿,采用自体角膜缘干细胞联合羊膜移植术可以取得一定治疗效果。