柑橘大实蝇人工饲养初步研究

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柑橘大实蝇是柑橘果树上的重要害虫,也是国际植物检疫性有害生物。由于寡食性和一化性的限制,阻碍了柑橘大实蝇的基础研究和防治技术的开发。本文对柑橘大实蝇人工饲养进行了初步研究,调查了野外柑橘大实蝇卵的发育动态,明确了柑橘大实蝇卵孵化的环境条件,分离鉴定了柑橘大实蝇雌虫产卵器可培养细菌,阐明了肠道细菌对柑橘大实蝇成虫生殖力和幼虫生长发育的影响,为柑橘大实蝇室内人工饲养体系的建立提供了科学的理论依据。主要结论如下:1.肠道可培养细菌对柑橘大实蝇成虫的生理作用研究了成虫肠道细菌Klebsiella oxytoca与Citrobacter freundii对柑橘大实蝇成虫寿命、交配、产卵的影响。结果表明:只添加高浓度(细菌数目为10~8CFU/m L)K.oxytoca显著提高成虫平均交配次数;前期经过抗生素处理后再添加低浓度(细菌数目为10~7CFU/m L)K.oxytoca显著提高成虫单雌产卵量;只添加高浓度K.oxytoca与前期经过抗生素处理后再添加高浓度K.oxytoca相比,显著提高成虫寿命、平均交配次数和单雌产卵量,且只添加低浓度K.oxytoca与前期经过抗生素处理后再添加低浓度K.oxytoca相比,显著提高雌虫寿命。前期经过抗生素处理后再添加C.freundii对成虫寿命、平均交配次数和单雌产卵量无显著提高作用。2.柑橘大实蝇雌虫产卵器可培养细菌分离鉴定以细菌培养技术为基础,结合实验菌株的16Sr DNA片段测序、菌落形态观察及细菌生理生化反应方法,对野外和室内柑橘大实蝇雌虫产卵器可培养细菌进行分离鉴定,结果确定野外柑橘大实蝇雌虫产卵器可培养细菌优势种是柠檬酸杆菌属Citrobacter sp.(16.67%);室内柑橘大实蝇雌虫产卵器可培养细菌优势种是粘质沙雷氏菌Serratia marcescens(18.75%)、粪肠球菌Enterococcus faecalis(12.5%)和乳酸球菌Lactococcus garvieae(12.5%)。3.柑橘大实蝇室内卵的发育研究和野外卵的发育动态调查通过野外采集蛆果和室内解剖得柑橘大实蝇卵,对其进行温度和光照处理,发现23℃黑暗处理柑橘大实蝇卵孵化率最高,达到40%,但整个发育过程比较缓慢,持续时间较长,需要约30-40天孵化。同时对6月底至8月底野外柑橘大实蝇卵的发育动态进行调查,发现野外柑橘大实蝇卵粒约35%发育至黑核阶段,随着时间推移,蛆果内卵粒发育阶段持续变化,至8月底超过95%卵粒完成胚胎发育,成功孵化为幼虫。4.肠道可培养细菌对柑橘大实蝇幼虫的生理作用研究了幼虫肠道细菌K.oxytoca与C.freundii对柑橘大实蝇初孵幼虫存活率、二龄幼虫存活率和化蛹率的影响。结果表明:柑橘大实蝇初孵幼虫饲料Q中单独添加C.freundii或单独添加K.oxytoca或同时添加K.oxytoca和C.freundii均能显著提高柑橘大实蝇初孵幼虫的存活率,其中单独添加C.freundii初孵幼虫的存活率最高;柑橘大实蝇二龄幼虫饲料H中添加K.oxytoca饲喂二龄幼虫对其存活率与化蛹率无显著提高作用;柑橘大实蝇初孵幼虫饲料Q中添加不同浓度(细菌数目为10~7CFU/m L、10~8CFU/m L)的K.oxytoca或C.freundii饲喂二龄幼虫,对其存活率与化蛹率无显著提高作用。
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