胜红蓟的主要化感物质早熟素Ⅱ降解菌的筛选、鉴定及其降解特性研究

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:NSWDAR
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
胜红蓟(Ageratum conyzoides)原产南美洲中部,在我国主要发生于西南及华南的热带和亚热带地区,是一种区域恶性杂草。它是一种能产生和释放多种化感物质的杂草,具有异株克生作用,常在农田等生态系统中成为优势种。挥发是胜红蓟向环境释放化感物质的主要途径,而挥发物中80%以上的成分是早熟素Ⅰ和早熟素Ⅱ,其中早熟素Ⅱ占挥发油总量的51.61%,早熟素Ⅰ占30.93%,并且早熟素Ⅱ的化感活性明显强于早熟素Ⅰ。因此,本研究选择早熟素Ⅱ为胜红蓟化感物质的代表物质。对于凭借化感武器实现入侵的外来植物,如何削弱或消除其对本地植物种的化感抑制作用是该类植物入侵生境恢复的关键。研究表明在化感植物的根系土壤中存在以化感物质为碳源的微生物,他们能够通过代谢将化感物质降解或转化。本研究以此为理论基础,拟从胜红蓟入侵地土壤中筛选出能够降解其化感物质的微生物。本研究首先探索了利用液相色谱仪测定早熟素Ⅱ的方法。然后进行了早熟素Ⅱ降解菌的筛选,研究中以胜红蓟的主要次生代谢产物早熟素Ⅱ为化感代表物质,从海南省各地有胜红蓟入侵历史的土壤(橡胶林下土壤、荒地、农田等)中筛选对早熟素Ⅱ降解效果好的菌株,通过对培养时间、接菌量、温度、摇床转速、初始PH、外加碳源、不同氮源对菌株降解能力影响的研究,获得该菌最佳降解条件,并对影响菌株降解能力的主要因素进行了两两组合试验,具体研究结果为:1、检测早熟素Ⅱ的色谱条件如下:Luna-C18柱(规格:150mm×4.6mm,5μm),流动相:以甲醇):V(水)=80:20,检测波长224nm,柱温35℃,流量1 mL/min,进样量10μL。2、通过以早熟素Ⅱ为唯一碳源的无机盐培养基的菌种生长试验(菌种粗筛),获得21株能以早熟素Ⅱ为唯一碳源的菌株;在此基础上,通过菌种降解早熟素Ⅱ的试验(以液相色谱检测早熟素Ⅱ的含量),复筛到1株对早熟素Ⅱ降解能力较强的菌株X2,该菌株能够在26h使早熟素Ⅱ的降解率达到51.21%。3、经形态观察、生理生化鉴定及16SrDNA测序,菌株X2与荚膜黄杆菌(Novosphingobium capsulatum)最相似,具有最高同源性,达99.1%。4、对培养时间、接菌量、温度、摇床转速、初始PH、外加碳源、不同氮源等因子对菌株X2降解能力影响的试验结果表明,培养26h菌株X2对早熟素Ⅱ的降解速度变缓;菌株X2降解早熟素Ⅱ的最适温度为25℃、最适PH为7.5;添加外加碳源后菌株X2的降解能力提高,其中较喜好的外加碳源是乳糖;在选用的不同氮源中,菌株X2较喜好酵母粉和蛋白胨。而接菌量、摇床转速对菌株X2降解早熟素Ⅱ的影响不大。5、对影响菌株X2降解能力较大的因素温度、初始PH、外加碳源、不同氮源任意两两组合进行了复合因素试验,结果表明,任意两因素的组合对菌株X2的降解率都存在显著的互作,且各单因素间对菌株X2的降解能力存在复合效应。培养温度与初始PH组合下,温度25℃、初始PH7或PH 7.5时,菌株的降解率达到最大,约为60%;培养温度与外加碳源组合下,各外加碳源与温度25℃或30℃组合时菌株的降解率最高,约为70%;培养温度与不同氮源组合下,温度25℃、以酵母粉或蛋白胨为氮源的菌株的降解率最高,约为67%。初始PH与外加碳源组合下,添加各外加碳源与初始PH7或PH7.5组合时菌株的降解率最高,约为75%;初始PH与不同氮源组合下,PH7或PH7.5、以酵母粉或蛋白胨为氮源的菌株的降解率最高,约为72%。外加碳源与不同氮源组合下,以酵母粉或蛋白胨为氮源、乳糖为外加碳源的菌株的降解率最高,约为79%,这是细菌X2在复合因素下达到的最高降解率。
其他文献
两栖类作为由水生过渡到陆生的物种,其生境中微生物区系十分复杂,在长期进化过程中两栖类皮肤逐步建立了通过皮肤分泌抗菌肽等物质以有效抵御环境中病原微生物侵袭的天然免疫
摘要:在初中英语教学中,学生阅读能力的培养起着十分重要的作用,本文就此做了相关探讨。  关键词:初中生;英语阅读;能力培养;方法探讨  我们都知道英语是拼英文字、形音联系得很紧密、很直接的一门语言。中学生阅读英语通常是由单词到词组或短语,再到句子,然后才能进行有意义的分段活动,最后才能理解整篇短文。我们要求学生阅读时跳过文字、词组或短句,由句子直接到短文的意义。  为了培养学生能掌握以词组或短语为
海岛棉组织培养过程的研究对于促进长绒棉分子育种改良工程具有极其重要的意义,目前已有一些关于陆地棉组织培养过程中形态变化和分子机理的研究报道,但是对于海岛棉组织培养过程的细胞形态变化和分子机制研究寥寥无几。本研究以海岛棉新海16为材料,选取胚性愈伤组织初期,胚性愈伤组织后期,体细胞胚形态建成初期的愈伤组织和对照无菌苗叶片进行石蜡切片观察和基因组DNA提取,初步说明了体胚中出现细胞凋亡现象,接着用DD