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目的: (1)为了明确高血氨对大鼠学习记忆功能的影响; (2)探讨高血氨影响大鼠学习记忆功能的分子机制; (3)为了明确醒脑静注射液改善高血氨大鼠学习记忆功能; (4)探讨醒脑静注射液改善高血氨大鼠学习记忆功能的分子机制。 方法: 36只SD大鼠(清洁级,雄性),按照EXCEL表随机法分为3组(每组12只):正常对照组、高血氨模型组和醒脑静治疗组。高血氨模型组大鼠腹腔内注射5%氯化铵,剂量为5ml/kg,间隔1小时后腹腔内注射生理盐水(NS)5ml/kg;醒脑静治疗组大鼠在注射氯化铵液间隔1小时后,腹腔内注射醒脑静注射液,剂量为5ml/kg;正常对照组大鼠腹腔内2次注射生理盐水作为对照;各组均为每周前4天给药,连续四周。实验第五周开始,水迷宫实验检测各组大鼠,记录平均逃避潜伏期和游泳总距离(反映学习记忆功能的两个参数)。 水迷宫实验后,腹腔内注射水合氯醛麻醉,下腔静脉采血,肝素抗凝血离心分离得血浆,生化分析仪检测血氨。大鼠脑组织分离的海马和皮层组织,一部分以4%的多聚甲醛中固定,用于苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色以及免疫组织化学方法检测NMDAR1表达;另一部分新鲜脑组织超低温保存,分别用RT-qPCR和Western Blot法检测CREB基因和蛋白表达。 结果: (1)三组大鼠试验前后体重差异无统计学意义,所有大鼠均有足够体力完成Morris水迷宫实验。 (2)高血氨模型组和醒脑静治疗组大鼠的血氨水平均明显高于正常对照组(P<0.05),但高血氨模型组和醒脑静治疗组两组之间的血氨水平无统计学差异。 (3)高血氨模型组大鼠较正常对照组平均逃避潜伏期延长(P<0.05),同时游泳总距离增加(P<0.05);提示高血氨模型组大鼠学习记忆能力下降。 (4)高血氨模型组大鼠大脑皮层与海马组织NMDAR1的表达较正常组大鼠明显下降(P<0.05),且高血氨模型组大鼠大脑皮层与海马组织CREB基因和蛋白表达均较正常组显著下降(P<0.05)。 (5)醒脑静治疗组大鼠较高血氨模型组,其平均逃避潜伏期缩短(P<0.05),游泳总距离也缩短(P<0.05)。 (6)与高血氨模型组比较,醒脑静治疗组大鼠脑组织(皮层与海马组织)NMDAR1基因表达均升高明显(P<0.05),且CREB基因和磷酸化蛋白表达升高均有统计学意义(P<0.05)。 结论: (1)高血氨能够导致学习记忆功能的下降。 (2)高血氨导致学习记忆功能的下降的分子机制是多方面的,可能是通过下调NMDAR1、CREB基因表达实现。 (3)醒脑静注射液在一定程度上改善了大鼠的空间学习记忆功能。 (4)醒脑静注射液可能是通过影响脑内NMDAR1、CREB基因表达从而发挥其改善大鼠的空间学习记忆功能的药理作用。